NME4 Kaninchen pAb - O00746

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NME4-Funktion und Lokalisierung

• NME4, auch bekannt als NDPK-D, NM23H4 oder nm23-H4, ist eine mitochondrienspezifische Nukleosiddiphosphat-Kinase (NDK), die die Übertragung einer Gamma-Phosphorylgruppe von ATP auf ein Nukleosiddiphosphat über ein Phosphohistidin-Intermediat katalysiert und eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des Nukleosidtriphosphat-Homöostase spielt. Verwandte Referenzen: PMID:10799505, PMID:16313181, PMID:18635542
• In vitro bevorzugt NME4 Purinnukleosidtriphosphate gegenüber Pyrimidinen, wobei Ribonukleoside effektivere Substrate als Desoxyribonukleoside sind (laut Ähnlichkeit).
• NME4 lokalisiert im mitochondrialen Intermembranraum, der Matrix und der äußeren Membran, wo es mit der Cardiolipin-reichen Innenmembran assoziiert und ADP im Intermembranraum produziert; dieses ADP wird direkt vom ADP/ATP-Translocase (ANT) in die Matrix aufgenommen, um die respiratorische ATP-Regeneration zu stimulieren. Verwandte Referenzen: PMID:18635542, PMID:24970086
• Es liefert auch GTP für mitochondriale GTPasen, wie die dynamin-verwandte GTPase OPA1, und unterstützt so die mitochondriale Dynamik. Verwandte Referenzen: PMID:24970086
• Neben seiner Kinaseaktivität besitzt NME4 eine von der Nukleosiddiphosphat-Kinase unabhängige Funktion: Es katalysiert den Transfer von Cardiolipin von der mitochondrialen Innenmembran zur Außenmembran durch die Bildung von Kontaktstellen, ein Prozess, der möglicherweise durch die Verfügbarkeit anionischer Phospholipide reguliert wird. Verwandte Referenzen: PMID:17028143, PMID:23150663
• NME4 ist weit verbreitet in Geweben, mit besonders hoher Expression in Prostata, Herz, Leber, Dünndarm und Skelettmuskulatur und niedriger Expression im Gehirn und in Blutleukozyten.
• Mit NME4 assoziierte Schlüsselwörter umfassen alternatives Spleißen, ATP-Bindung, Lipid-Bindung, Metall-Bindung und Proteomik-Identifikation, was seine vielseitigen Rollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-187 von humanem NME4 (NP_005000.1) umfasst, was dem vollständigen reifen Protein entspricht; diese breite Abdeckung kann die Detektion mehrerer Isoformen erleichtern.
• Dieser Antikörper ist für Western Blot (WB) und ELISA-Anwendungen validiert; für WB sollten mitochondriale oder Gesamtzelllysate aus humanen, murinen oder Rattengeweben getestet werden, um Spezifität und Signalstärke zu bewerten.
• Angesichts des vorhergesagten Proteingewichts von 21 kDa sollten Standard-SDS-PAGE-Bedingungen die Bande auflösen; posttranslationale Modifikationen oder alternatives Spleißen könnten jedoch zusätzliche Banden verursachen.
• Optimale Arbeitsverdünnungen und experimentelle Bedingungen (z. B. Blockierung, Inkubationszeiten) sollten empirisch für jedes Assaysystem ermittelt werden.

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