NFS1 polyklonaler Kaninchenantikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y697

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NFS1

• NFS1 ist eine Cystein-Desulfurase und gehört zur Klasse-V der Pyridoxalphosphat-abhängigen Aminotransferasefamilie. Sie dient als zentrale schwefelliefernde Komponente des mitochondrialen Eisen-Schwefel-Cluster-(ISC)-Assemblierungskomplexes, katalysiert die Desulfurierung von L-Cystein zu L-Alanin und bildet ein Persulfid-Zwischenprodukt an ihrem aktiven Zentrum aus Cystein (PubMed:18650437, PubMed:29097656, PubMed:31101807).
• Als Bestandteil der ISC-Maschinerie überträgt NFS1 den Persulfidschwefel in FXN-abhängiger Weise auf das Gerüstprotein ISCU, um die Assemblierung von [2Fe-2S]-Clustern einzuleiten. Der Prozess wird durch Reduktionsäquivalente von FDX2 und den chaperonvermittelten Clustertransfer auf Ziel-Apoproteine abgeschlossen.
• Neben der ISC-Biogenese fungiert NFS1 als Schwefeldonor für MOCS3 und ist an der Biosynthese des Molybdän-Cofaktors beteiligt, was seine duale Rolle in essenziellen Schwefeltransportwegen hervorhebt (PubMed:18650437, PubMed:23593335).
• Das Protein ist in mehreren subzellulären Kompartimenten lokalisiert: Mitochondrien, Zytoplasma, Zytosol, Zellkern und Zentrosom, was seine breite zelluläre Verteilung widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression ist im Herzen und in der Skelettmuskulatur am höchsten; zusätzlich wurde das Protein im Gehirn, in der Leber und in der Bauchspeicheldrüse nachgewiesen.
• Zu den UniProt-Schlüsselwörtern und -Merkmalen gehören alternative Initiation, alternatives Spleißen, Krankheitsvariante (COXPD52), Pyridoxalphosphatbindung und Identifizierung durch Proteomik.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 208–457 des humanen NFS1. Diese Region liegt innerhalb der konservierten katalytischen Domäne, und der resultierende Antikörper kann Volllängen-NFS1 sowie möglicherweise bestimmte Spleißisoformen erkennen. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem relevanten Probensystem.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 50 kDa. Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und überprüfen Sie das Bandenmuster im interessierenden Gewebe oder in der interessierenden Zelllinie.
• Bei Immunfluoreszenz und Immunzytochemie sind mitochondriale und zytosolische Färbungsmuster zu erwarten. Zur Bestätigung der Lokalisation wird eine Ko-Färbung mit Organellenmarkern empfohlen.
• ELISA kann zur Quantifizierung von rekombinantem oder endogenem NFS1 eingesetzt werden. Optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und die Antikörperkonzentration anhand einer Standardkurve mit bekanntem Antigen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte wurde berichtet; für andere Spezies werden ein In-silico-Sequenzvergleich und Pilotversuche empfohlen.

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