NFKB1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19838

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NFKB1-Funktion und -Lokalisierung

• NFKB1 kodiert den p105-Vorläufer, der kotranslational durch das Proteasom verarbeitet wird, um die aktive p50-Untereinheit zu erzeugen (PubMed:1423592). Verwandte Referenzen: PMID:1423592
• Die p50-Untereinheit bildet funktionelle NF-kB-Dimere durch Assoziation mit anderen Rel-Familienmitgliedern, insbesondere das p65-p50-Heterodimer, das als potenter transkriptioneller Aktivator wirkt (PubMed:1740106, PubMed:7830764). Verwandte Referenzen: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-kB-Dimere binden spezifisch an die kappa-B-Konsensus-DNA-Sequenz (5'-GGRNNYYCC-3'), die in Enhancer-Regionen von Genen lokalisiert ist, die Immunreaktionen, Akutphasenreaktionen, Entzündungen und das Zellüberleben steuern.
• In unstimulierten Zellen wird NF-kB im Zytoplasma durch Inhibitor-I-kB-Proteine zurückgehalten; nach Aktivierung durch diverse Reize wird I-kB phosphoryliert und abgebaut, wodurch NF-kB freigesetzt wird, in den Kern einzudringen und die Expression von Zielgenen zu regulieren.
• Die vollständige Länge von p105 fungiert ebenfalls als ein I-kB-ähnlicher Inhibitor, der assoziierte NF-kB-Proteine im Zytoplasma hält und die MAPK-Signalgebung durch Repression von MAP3K8 moduliert, bis ihr Abbau aktives MAP3K8 freisetzt.
• Schlüssel-posttranslationale Modifikationen von NFKB1 umfassen Phosphorylierung, Acetylierung, Ubiquitinierung und S-Nitrosylierung, die die transkriptionelle Aktivität und Stabilität feinabstimmen.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist in ruhenden Zellen primär zytoplasmatisch und nach Aktivierung des Weges nukleär.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper, der gegen ein Peptid innerhalb der N-terminalen Region erhoben wurde, die sowohl p105 als auch p50 gemeinsam ist, wird erwartet, beide Formen nachzuweisen; im WB sind Banden bei ~105 kDa (p105) und ~50 kDa (p50) zu erwarten, abhängig vom Zelltyp und der Stimulation.
• Für IHC-P und IF/ICC können Antigen-Retrieval-Bedingungen und Fixierungsmethoden eine Optimierung erfordern; erwägen Sie, sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbemuster zu testen.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten Kontrollen, wie siRNA-vermitteltem Knockdown oder Knockout-Zelllinien.
• Für ELISA-Anwendungen bestätigen Sie, dass der Antikörper native Proteinkonformationen in Ihrer Probenmatrix erkennt.
• Passen Sie Blockierungs- und Antikörperverdünnungsbedingungen empirisch an Ihr experimentelles System an.

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