NFATC4 Kaninchen-pAk für WB und ELISA - Q14934

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NFATC4-Funktion und -Lokalisierung

• NFATC4 (auch bekannt als NFAT3) ist ein Mitglied der NFAT-Familie von Transkriptionsfaktoren, gekennzeichnet durch eine konservierte DNA-Bindungsdomäne, die die Konsensussequenz 5'-GGAAAAT-3' erkennt.
• Es fungiert als ein Ca2+-regulierter Transkriptionsfaktor, der bei calciumabhängiger Aktivierung zwischen Zytoplasma und Zellkern wandert.
• In T-Zellen stimuliert NFATC4 die Transkription von Zytokin-Genen, einschließlich IL2 und IL4, und spielt eine zentrale Rolle bei der Immunaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:18347059, PMID:18668201, PMID:7749981
• NFATC4 ist für die embryonale Herzentwicklung essentiell; es reguliert Herzgene wie NPPB/BNP und MYH7 und beteiligt sich an der mitochondrialen Energiemetabolismus in Kardiomyozyten.
• Es fördert die Differenzierung von Adipozyten durch Bindung an den Promotor des PPARG-Gens und Modulation seiner transkriptionellen Aktivität. Verwandte Referenzen: PMID:11997522
• Im Nervensystem trägt NFATC4 zur hippokampalen Neurogenese und zur Bildung des Langzeitgedächtnisses bei und aktiviert den BACE1-Promotor, was möglicherweise die APP-Verarbeitung beeinflusst. Verwandte Referenzen: PMID:25663301
• Weit verbreitet exprimiert, mit hohen Spiegeln in Plazenta, Lunge, Niere, Hoden, Eierstock und Herz; im Hippocampus lokalisiert es sich zum Gyrus dentatus, CA3-Neuronen und zur hippocampalen Fissur.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 560-710) entspricht einem Bereich, der zwischen menschlichem und murinem NFATC4 konserviert ist, was die erwartete Kreuzreaktivität unterstützt; validieren Sie dies immer in Ihrem spezifischen Probekontext.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~95 kDa; verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit niedriger Prozentsatz und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können mehrere Mitglieder der NFAT-Familie erkannt werden, wenn die Epitope konserviert sind; bestätigen Sie die Spezifität durch Knockdown- oder Überexpressionsexperimente in Ihrem Zellsystem.
• Für ELISA sollten Standardprotokolle für polyklonale Antikörper hinsichtlich Beschichtungskonzentration und Blockierungsbedingungen optimiert werden, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Angesichts des nukleären/zytoplasmischen Shuttling von NFATC4 sollten Sie eine subzelluläre Fraktionierung oder Stimulation (z. B. Ionomycin) in Betracht ziehen, um aktivierte nukleäre Formen in Ihren Proben anzureichern.

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