NF-κB2-Kaninchen-pAb – Polykolonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q00653

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von NF-κB2

• NF-κB2 kodiert den p100-Vorläufer und dessen prozessierte p52-Untereinheit, einen Bestandteil der NF-κB-Transkriptionsfaktorfamilie.
• Es bildet Homo- oder Heterodimere mit Rel-Proteinen (RELA, RELB, REL), um Gene zu regulieren, die an Immunantwort, Entzündung, Zellwachstum und Apoptose beteiligt sind.
• Im nicht-kanonischen NF-κB-Signalweg wird p100 proteasomal zu p52 prozessiert, wodurch der RelB-p52-Aktivator-Komplex gebildet wird.
• p52-p52-Homodimere wirken als Transkriptionsrepressoren, während p52-RELA- und p52-RELB-Komplexe Zielgene aktivieren können.
• Das Protein ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert; zytoplasmatisches p100 hält assoziierte NF-κB-Proteine zurück, während p52 nach der Aktivierung in den Zellkern transloziert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Prozessierungsereignisse, die seine Aktivität regulieren (UniProt-Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Isopeptidbindung, Ubl-Konjugation).
• NF-κB2 ist an der Regulation der zirkadianen Uhr beteiligt, indem es gemeinsam mit RELB die CLOCK-BMAL1-Aktivität reprimiert.
• Genetische Rearrangements und Mutationen in NFKB2 werden mit Immundefekten wie CVID10 in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 690–899 des humanen NF-κB2 (C-terminale Region von p100) und kann daher sowohl den p100-Vorläufer als auch die prozessierte p52-Form erkennen.
• Beim Western Blot (WB) können abhängig von der zellulären Prozessierung eine Bande bei etwa 97 kDa (p100) und eine kleinere Bande bei etwa 52 kDa (p52) beobachtet werden.
• Verwenden Sie geeignete Zelllysate oder Stimuli, die den nicht-kanonischen NF-κB-Signalweg aktivieren, um die Prozessierung von p100 zu p52 zu beurteilen.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Fixierung und Permeabilisierung optimiert werden, um sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Pools nachzuweisen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Mausproben wurde berichtet; validieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem.
• ELISA kann zum Nachweis von rekombinantem oder endogenem NF-κB2-Protein geeignet sein; eine Titration der Antikörperkonzentration wird empfohlen.

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