NCR3 Kaninchen pAb für WB, ELISA - O14931

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NCR3-Funktion und -Lokalisierung

• NCR3 (Natural cytotoxicity triggering receptor 3), auch bekannt als NKp30 oder CD337, ist ein aktivierender natürlicher Killerzell(NK)-Rezeptor, der durch das NCR3-Gen kodiert wird.
• Er fungiert als Zellmembranrezeptor, der nach Bindung an extrazelluläre Liganden wie BAG6 und NCR3LG1 die NK-Zell-Zytotoxizität auslöst und die Abtötung von Tumorzellen fördert.
• Die Bindung von NCR3 durch seinen Liganden BAG6 fördert auch die Reifung myeloider dendritischer Zellen (DC), sowohl durch die Eliminierung unreifer DCs als auch durch die Induktion der Freisetzung von TNF-α und IFN-γ durch NK-Zellen.
• Der Rezeptor wird selektiv auf der Oberfläche aller ruhenden und aktivierten NK-Zellen exprimiert, wobei eine schwache Expression in der Milz nachgewiesen wurde.
• Als Typ I Transmembranglykoprotein enthält NCR3 eine immunoglobulinähnliche Domäne in seiner extrazellulären Region und ist für die Signaltransduktion auf assoziierte Adaptorproteine (z.B. CD3ζ, FcεRIγ) angewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-gebundene Glykosylierung und die Bildung einer Disulfidbindung innerhalb der Ig-Domäne, die für die korrekte Faltung und Ligandenerkennung entscheidend sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, was zur funktionellen Vielfalt des Rezeptors in der Immunüberwachung beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 19-135), die die ligandbindende Ig-ähnliche Region enthält; daher wird erwartet, dass der Antikörper den nativen Rezeptor auf der Zelloberfläche erkennt.
• Für Western Blotting unter reduzierenden Bedingungen, erwägen Sie eine Beladungsmenge von 20-40 µg Lysat von NK-Zelllinien (z.B. NK-92) oder aktivierten primären NK-Zellen und validieren Sie das Band bei dem vorhergesagten Molekulargewicht (~22 kDa).
• Aufgrund von Glykosylierung und potenzieller Isoformvariation kann das beobachtete Molekulargewicht im WB leicht höher erscheinen; die Einbeziehung von Deglykosylierungskontrollen oder die Verwendung spezifischer Zelllinien kann helfen, die Spezifität zu überprüfen.
• In ELISAs kann das Beschichten mit rekombinantem NCR3-Protein oder zellbasierten Formaten untersucht werden; geeignete Blockierungs- und Detektionsbedingungen sollten für das spezifische Assaysystem optimiert werden.

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