MYLK Kaninchen-mAb für WB, ELISA - Q15746

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MYLK-Funktion und -Lokalisierung

• MYLK kodiert die Myosin-Leichtketten-Kinase, glatter Muskel (MLCK), ein kalzium-/calmodulinabhängiges Enzym, das auch als kinase-verwandtes Protein (KRP) und Telokin bekannt ist.
• Sie phosphoryliert Myosin-Leichtketten (MLC), um die Kontraktion der glatten Muskulatur zu regulieren, und moduliert die Aktin-Myosin-Interaktion über nicht-kinase Aktivität.
• Beteiligt an Entzündungsprozessen wie Apoptose, Gefäßpermeabilität, Leukozytendiapese und mit Asthma verbundener Atemwegshyperreaktivität.
• Fördert Zellmigration und Tumormetastasierung durch Mechanismen einschließlich RhoA-abhängiger Membranblebbing und TRPC5-Kanalaktivierung.
• Lokalisiert im Zytoplasma, Lamellipodium, Furche und Stressfasern, wo sie die Dynamik des Zytoskeletts steuert.
• Wird in glatter Muskulatur und verschiedenen fetalen/adulten Geweben exprimiert; die nicht-muskuläre Isoform 2 ist die vorherrschende Spleißvariante.
• Telokin reichert sich in gut differenzierten intestinalen Enterozyten als Reaktion auf TNF an, und die Kinaseaktivität ist für die gastrointestinalen Motilität und die Epithelbarrierenfunktion erforderlich.
• Zu den wichtigsten molekularen Merkmalen gehören alternatives Spleißen, Calmodulin-Bindung, Aktin-Bindung, ATP-Bindung und Serin/Threonin-Proteinkinase-Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für WB: Berücksichtigen Sie das Molekulargewicht von 211 kDa; verwenden Sie SDS-PAGE-Gele mit niedriger Prozentsatz (z. B. 6-8 %) und optimierte Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in MYLK-exprimierenden Zell- oder Gewebelysaten, wie z. B. glatter Muskulatur, Endothel oder bestimmten Krebszelllinien.
• Für ELISA: Die Kombination mit Detektionsantikörpern oder Peptid-Wettbewerbsassays kann die Epitoperkennung bestätigen; das Immunogen ist ein lineares Peptid innerhalb der Reste 1800-1900.
• Fixierungs- und Antigen-Retrieval-Methoden können die Immunreaktivität beeinflussen; Testen Sie Bedingungen, die für den Probentyp geeignet sind.
• Beachten Sie, dass alternatives Spleißen Isoformen wie Telokin (~17 kDa) generiert; bestätigen Sie, dass die Zielbande dem全长-MYLK entspricht, wenn Sie WB verwenden.
• Die berichtete Kreuzreaktivität ist menschlich; Validieren Sie bei Bedarf die Leistung mit orthologen Proteinen anderer Spezies.

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