mTOR Kaninchen-pAb - P42345

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: mTOR-Funktion und -Lokalisierung

• mTOR (Mechanistic Target of Rapamycin) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als zentraler Regulator des Zellstoffwechsels, des Wachstums und des Überlebens dient und Signale von Hormonen, Wachstumsfaktoren, Nährstoffen, Energie und Stress integriert. Verwandte Referenzen: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• Es fungiert innerhalb zweier unterschiedlicher Komplexe: mTORC1 und mTORC2. mTORC1 ist nährstoffempfindlich und fördert anabole Prozesse wie Protein-, Lipid- und Nukleotidsynthese, während mTORC2 nährstoffunempfindlich ist und Proliferation, Überleben und Zytoskelettorganisation durch Aktivierung von AGC-Kinasen wie AKT, PKC und SGK1 reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260 PMID:21376236 PMID:24670654
• mTORC1 phosphoryliert direkt Schlüsselregulatoren der Translation, einschließlich EIF4EBP1 (4E-BP1) und RPS6KB1 (S6K), und verbessert so die mRNA-Translation und die Ribosomenbiogenese. Verwandte Referenzen: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692
• mTORC1 reguliert auch die Lipidsynthese über SREBF1 und unterdrückt die Autophagie durch Phosphorylierung von ULK1 und anderen autophagiebezogenen Proteinen. Verwandte Referenzen: PMID:23426360 PMID:32561715 PMID:20537536
• Die durch mTORC2 vermittelte Phosphorylierung von AKT an Ser473 ist entscheidend für die volle AKT-Aktivierung und beeinflusst das Zellüberleben, den Stoffwechsel und die Migration. Verwandte Referenzen: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:21376236 PMID:24670654
• Subzellulär lokalisiert sich mTOR dynamisch zu Lysosomen, endoplasmatischem Retikulum, Golgi-Apparat, Mitochondrien, Zellkern und zytoplasmatischen Vesikeln als Reaktion auf Nährstoff- und Wachstumsfaktorsignale.
• mTOR ist in Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei die höchsten Spiegel im Hoden beobachtet werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-300) von humanem mTOR entspricht. Diese Sequenz ist zwischen Mensch, Maus und Ratte konserviert, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für den Western Blot (WB) ist ein Band bei ca. 289 kDa zu erwarten. Verwenden Sie einen geeigneten Prozentsatz an Gelen und Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) kann der Antikörper mTOR und seine assoziierten Komplexkomponenten herunterziehen; validieren Sie unter nativen Bedingungen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann die Färbung je nach Zelltyp und Kulturbedingungen in zytoplasmatischen, lysosomalen und Membrankompartimenten auftreten. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu.
• Optimale Verdünnungen und Bedingungen sollten empirisch für jede Anwendung und jeden Probentyp bestimmt werden.

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