MRPS16 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y3D3

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MRPS16-Funktion und Lokalisierung

• MRPS16 kodiert das kleine ribosomale Untereinheitsprotein bS16m, eine Komponente des mitochondrialen Ribosoms (Mitoribosom), das für die Synthese von 13 essentiellen Proteinen des oxidativen Phosphorylierungssystems verantwortlich ist.
• Auch bekannt als 28S ribosomales Protein S16, mitochondrial (MRP-S16), ist es Teil der kleinen 28S-Untereinheit und trägt zur strukturellen Integrität und Funktion des Mitoribosoms bei.
• Das Protein wird im Zellkern kodiert und mit einer mitochondrialen Zielsequenz (Transitpeptid) synthetisiert, die seinen Import in die mitochondriale Matrix steuert.
• Alternatives Spleißen des MRPS16-Gen-Transkripts erzeugt mehrere Isoformen, die möglicherweise eine gewebsspezifische Expression oder regulatorische Rollen haben.
• MRPS16 ist ein Phosphoprotein, und posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung könnten seine Assembly, Aktivität oder Interaktion mit anderen mitochondrialen Proteinen modulieren.
• Mutationen in diesem Gen sind mit der kombinierten oxidativen Phosphorylierungsdefizienz 2 (COXPD2) verbunden, einer primären mitochondrialen Erkrankung, die durch Laktatazidose, Hypotonie und schlechtes Wachstum gekennzeichnet ist.
• Die dreidimensionale Struktur von MRPS16 innerhalb des Mitoribosoms wurde aufgeklärt und liefert Einblicke in die einzigartigen Merkmale der mitochondrialen Translationsmaschinerie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 137 Aminosäuren von humanem MRPS16, was das Transitpeptid und Teile des reifen Proteins umfasst. Aufgrund der polyklonalen Natur kann dies zur Erkennung mehrerer Epitope führen, wodurch möglicherweise sowohl die Vorstufe als auch die reife Form nachgewiesen werden.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ca. 15 kDa zu erwarten. Um das Signal zu verbessern, sollten Sie mitochondrienangereicherte Proteinextrakte verwenden, da MRPS16 in den Mitochondrien lokalisiert ist.
• Überprüfen Sie bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie die mitochondriale Lokalisierung durch Co-Färbung mit einem mitochondrialen Marker (z. B. MitoTracker oder anti-TOM20) und verwenden Sie geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit murinem und rattigem MRPS16. Validieren Sie seine Spezifität in der relevanten Spezies und im entsprechenden Gewebetyp vor quantitativen Assays.
• Optimieren Sie für ELISA die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung. Der polyklonale Antikörper kann als Erfassungs- oder Nachweisreagenz verwendet werden, aber eine Kombination mit einem monoklonalen Antikörper könnte für einen hochempfindlichen Sandwich-ELISA erforderlich sein.

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