Maus Anti-Kaninchen IgM (Fc) monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie – P03988

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der IgM-Fc-Region

• Die Ig-mu-Ketten-C-Region (sekretierte Form, P03988) ist ein zentraler Bestandteil der IgM-Konstantregion und stellt die strukturelle Unterstützung für den Antikörper bereit.
• Wie in UniProt annotiert handelt es sich um ein sekretiertes Glykoprotein, was mit seinem Vorkommen im Serum als Teil des pentameren IgM übereinstimmt.
• Das Protein verfügt über Disulfidbindungen, die die Immunoglobulinfaltung stabilisieren und die Assoziation der schweren Ketten vermitteln.
• Es enthält immunoglobulinähnliche Domänen und wird daher der Immunoglobulinsuperfamilie zugeordnet.
• Durch alternatives Spleißen entstehen verschiedene Isoformen der mu-Kette, die sowohl membrangebundene als auch sekretierte Formen von IgM ermöglichen – dieser Eintrag repräsentiert die sekretierte Form.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper ist direkt mit konjugiert, einem hellen und photostabilen grünen Fluorophor. Er ist daher sofort für die Durchflusszytometrie einsatzbereit und benötigt keinen sekundären Antikörper.
• Das Immunogen entspricht der Fc-Region (Aminosäuren 107–458) von Kaninchen-IgM, was eine spezifische Erkennung der konstanten Domäne der schweren Kette gewährleistet und Kreuzreaktivitäten mit anderen Kaninchen-Immunoglobulinen oder leichten Ketten reduziert.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration für Ihren Zelltyp zu ermitteln; ein Anfangsbereich von 0,1–1 µg pro Million Zellen ist üblich für Oberflächenfärbungen.
• Verwenden Sie geeignete Kontrollen wie einen Isotyp-Kontrollantikörper und einen Vitalfarbstoff, um spezifische von unspezifischen Bindungen zu unterscheiden.
• Bei der Färbung von sezerniertem oder Serum-IgM ist mit einem potenziell hohen Hintergrund zu rechnen; eine Blockierung mit normalem Kaninchenserum kann die Spezifität verbessern.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen; lagern Sie den Antikörper für kurzfristige Verwendung bei 4°C geschützt vor Licht, aliquotieren Sie ihn und lagern Sie ihn für langfristige Lagerung bei -20°C.
• Validieren Sie die Spezifität durch Tests an Kaninchen-Splenozyten oder B-Zelllinien und bestätigen Sie das Fehlen einer Reaktivität mit IgM anderer Spezies, für die keine Kreuzreaktivität angegeben ist.

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