Maus anti-menschlicher CD3 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie – P07766

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der CD3-Epsilon-Kette

• CD3E codiert die Epsilon-Kette des T-Zell-Rezeptor (TCR)-CD3-Komplexes, einem multimeren Rezeptor, der essenziell für die T-Lymphozyten-Aktivierung und adaptive Immunität ist. Verwandte Referenzen: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Nach Bindung des TCR werden die Immunorezeptor-Tyrosin-basierten Aktivierungsmotive (ITAMs) in den zytoplasmatischen Abschnitten der CD3-Ketten durch Src-Kinasen phosphoryliert, was nachgeschaltete Signalwege ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:2470098 PMID:40592325
• Phosphorylierte CD3E-ITAMs dienen als Bindungsstellen für die Kinase ZAP70, die anschließend phosphoryliert und zu einem aktiven Enzym umgewandelt wird, wodurch die T-Zell-Aktivierungssignale weitergeleitet werden.
• CD3E ist entscheidend für die korrekte T-Zell-Entwicklung und funktioniert sowohl im Vorläufer-TCR als auch in reifen TCR-Komplexen während der Thymozytenselektion.
• Der zytoplasmatische Bereich von CD3E enthält Endozytose-Motive, die die Internalisierung und Herabregulierung von TCR-CD3-Komplexen an der Zelloberfläche vermitteln und so die T-Zell-Reaktivität modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10384095 PMID:26507128
• CD3E fungiert außerdem als Rezeptor für ITPRIPL1, das die T-Zell-Aktivierung hemmt, indem es die Interaktion mit NCK1 fördert und den ERK-NFkB-Signalweg blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:12110186 PMID:38614099
• Das Protein lokalisiert als Einpass-Typ-I-Membranprotein an der Zellmembran und verfügt über eine extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domäne sowie einen zytoplasmatischen Bereich mit ITAM.
• CD3E unterliegt wichtigen posttranslationalen Modifikationen, vor allem der Tyrosinphosphorylierung, die zentral für seine Signalfunktion ist. Verwandte Referenzen: PMID:2470098 PMID:40592325

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das verwendete Immunogen ist rekombinantes menschliches CD3-Protein; stellen Sie sicher, dass Ihre Probenvorbereitung die native Konformation von CD3 erhält, um eine optimale Antikörperbindung zu gewährleisten.
• Für die Durchflusszytometrie führen Sie eine Antikörper-Titration mit Ihrer spezifischen Zellpopulation durch, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen und Hintergrundsignale zu minimieren.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität des Antikörpers in Ihrem experimentellen System, da dieser Klon spezifisch für menschliches CD3 ist und CD3 anderer Spezies möglicherweise nicht erkennt.
• weist eine Anregung bei ca. 633 nm auf; gestalten Sie Ihr Mehrfarbenpanel mit kompatiblen Fluorophoren, um spektrale Überlappungen zu vermeiden.
• CD3 wird auf reifen T-Lymphozyten exprimiert; verwenden Sie passende Gating-Strategien und Vitalfarbstoffe, um lebende T-Zell-Subpopulationen korrekt zu identifizieren.

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