Maus-anti-Human CD15/SSEA-1 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P22083

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Alpha-(1,3)-Fucosyltransferase 4 (FUT4) Funktion und Lokalisierung

• Alpha-(1,3)-Fucosyltransferase 4 (FUT4) ist eine Golgi-residente Glykosyltransferase, die den Lewis-X-(LeX)-Glykan-Determinanten (CD15) synthetisiert, indem sie Fucose in alpha(1,3)-Verknüpfung auf N-Acetylglucosamin (GlcNAc) auf Typ-2-Lactosamin-Ketten überträgt. Verwandte Referenzen: PMID:1702034, PMID:1716630, PMID:29593094
• CD15/LeX ist ein Schlüssel-Zelloberflächen-Glykoepitop, das an Zelladhäsion, Migration und Erkennung von Immunzellen beteiligt ist, insbesondere durch Interaktionen mit Selektinen (SELE, SELL, SELP) während des Leukozyten-Trafficking und Homing.
• FUT4 arbeitet zusammen mit FUT7, um Selektin-Liganden mit fucosylierten Glykanen zu dekorieren, ein kritischer Schritt bei der Lymphozyten-Rezirkulation und entzündlichen Reaktionen.
• Das Enzym kann auch sialylierte Akzeptoren modifizieren, um Sialyl-Lewis-X- und 6‑Sulfo-Sialyl-Lewis-X-Determinanten zu generieren, die als hochaffine Liganden für dieselbe Selektin-Familie dienen. Verwandte Referenzen: PMID:1716630, PMID:29593094
• FUT4 lokalisiert ausschließlich an der medialen/trans‑Golgi-Membran über einen N‑terminalen Signal‑Anker, kompatibel mit seiner Rolle bei der terminalen Glykan-Prozessierung.
• Die Gewebeexpression umfasst mesenchymale Stammzellen, myeloische und lymphoide Linien sowie unreife Promyelozyten und verknüpft CD15 sowohl mit der hämatopoetischen Differenzierung als auch mit der Stammzellbiologie.
• Zusätzlich kann FUT4 interne LacNAc-Einheiten fucosylieren, um das VIM‑2-Epitop zu bilden, eine weitere selektinbindende Struktur, die die Zelloberflächen-Glykan-Repertoires weiter diversifiziert. Verwandte Referenzen: PMID:11278338, PMID:1716630

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser -konjugierte Antikörper ist gebrauchsfertig für direkte Durchflusszytometrie; titrieren Sie den Antikörper von 0,5–5 µg/ml, um die optimale Färbekonzentration für Ihren Zelltyp zu bestimmen.
• Verwenden Sie lebende, unfixierte menschliche Zellen (z. B. periphere Blutleukozyten oder kultivierte Zelllinien), um das native Kohlenhydrat-Epitop zu erhalten, da Fixierung die CD15-Erkennung verändern kann.
• Schließen Sie eine geeignete Isotyp-Kontrolle ein und verwenden Sie Fc-Rezeptor-Blockierung, um unspezifische Bindung zu beurteilen.
• Wenn eine intrazelluläre Golgi-Färbung erforderlich ist, müssen Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um Membranstrukturen zu erhalten.

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