MonoMethyl-UHRF1-K385 Kaninchen pAb (Q96T88) - Epigenetik-Antikörper für WB, DB, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: UHRF1-Funktion und -Lokalisierung

• UHRF1 (E3-Ubiquitin-Protein-Ligase UHRF1) ist ein zentraler epigenetischer Regulator, der DNA-Methylierung und Chromatinmodifikation verbindet. Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Vererbung von DNA-Methylierungsmustern, indem es während der Replikation DNMT1 an hemimethylierte DNA rekrutiert und so die treue Weitergabe von Methylierungsmarkierungen sicherstellt. Verwandte Referenzen: PMID:10646863, PMID:15009091, PMID:19056828, PMID:23022729, PMID:24013172, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:30392929, PMID:30392931, PMID:39607687.
• UHRF1 wirkt sowohl als Histon-Leser als auch -Schreiber und erkennt spezifisch H3K9me3 und H3R2me0, was seine E3-Ubiquitin-Ligase-Aktivität aktiviert. Es monoubiquitiniert dann Histon H3 an Lys-18 (H3K18ub) und schafft so eine Andockstelle für DNMT1. Es ubiquitiniert auch H3K14 und H3K23 in geringerem Maße. Verwandte Referenzen: PMID:15361834, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:18772889, PMID:21745816, PMID:21777816, PMID:22100450, PMID:22837395, PMID:23022729, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:24013172.
• Zusätzlich zu seiner Rolle bei der DNA-Methylierung ist UHRF1 an der DNA-Reparatur beteiligt, indem es mit UHRF2 zusammenarbeitet, um die Rekrutierung von FANCD2 an interstrangige Quervernetzungen sicherzustellen. Es ubiquitiniert auch Nicht-Histon-Proteine wie KIF11 und PML und beeinflusst so die Spindelarchitektur und andere Prozesse. Verwandte Referenzen: PMID:30335751, PMID:22945642, PMID:37728657.
• UHRF1 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert und assoziiert während der S-Phase mit Chromosomen, insbesondere an replizierendem perizentrischem Heterochromatin. In Zellen außerhalb der S-Phase verteilt es sich homogen durch den Kern. Verwandte Referenzen: PMID:10646863, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:21777816.
• Die Gewebeexpression wird in Thymus, Knochenmark, Hoden, Lunge und Herz beobachtet, wobei eine Überexpression bei Brustkrebs berichtet wurde. Verwandte Referenzen: PMID:10646863, PMID:12838312, PMID:15361834.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western-Blot-Nachweis sollten die Anreicherung von Kernextrakten oder Chromatinfraktionen in Betracht gezogen werden, um das Signal für UHRF1 und seine Methylierungsvarianten zu verbessern.
• Da der Antikörper spezifisch monomethyliertes K385 erkennt, sollten unmodifizierte und unterschiedlich methylierte Peptidkontrollen in Dot-Blot (DB)- oder ELISA-Assays verwendet werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• UHRF1-Expression und -Modifikation sind zellzyklusabhängig; die Synchronisierung von Zellen in der S-Phase kann die Detektion des Ziels verbessern.
• Es wird berichtet, dass der Antikörper mit murinem und Ratten-UHRF1 kreuzreagiert; eine Validierung in der relevanten Spezies und dem Probentyp ist jedoch erforderlich, um die erwartete Leistung sicherzustellen.
• Blockierungs- und Waschbedingungen optimieren, da methylierungs-spezifische Antikörper eine sorgfältige Anpassung erfordern können, um unspezifische Bindung zu minimieren.

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