MonoMethyl-Histon H4-K20 Kaninchen pAb (P62805) – Epigenetik-Forschungsantikörper für WB, IHC, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H4

Histon H4 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, der Grundeinheit des Chromatins. Zusammen mit den Histonen H2A, H2B und H3 bildet es ein Oktamer, um das DNA gewickelt ist, wodurch das Genom im Zellkern kompaktiert wird. Diese strukturelle Rolle ist grundlegend für alle DNA-abhängigen Prozesse, einschließlich Transkription, Replikation, Reparatur und Chromosomensegregation.

Histon H4 lokalisiert hauptsächlich im Zellkern und ist während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen assoziiert. Während der Spermatogenese können spezifische Acetylierungsmuster seine nukleare Lokalisation beeinflussen.

Die Funktion und Interaktionen von Histon H4 werden dynamisch durch eine Vielzahl posttranslationaler Modifikationen (PTM) reguliert, die oft als "Histon-Code" bezeichnet werden. Dazu gehören Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung, Ubiquitinierung und verschiedene Acylierungen an mehreren Resten. Diese Marken verändern die Chromatinstruktur und rekrutieren Effektorproteine, um Genexpression, DNA-Schadensantwort und Chromatin-Remodellierung zu modulieren.

Unter diesen ist die Methylierung von Lysin 20 (H4K20) eine kritische epigenetische Markierung. Die Monomethylierung von H4K20 (H4K20me1) ist an transkriptionelle Aktivierung, Zellzyklusprogression und die DNA-Schadensantwort beteiligt. Das Gleichgewicht zwischen Mono-, Di- und Trimethylierung an dieser Stelle wird streng durch spezifische Methyltransferasen und Demethylasen kontrolliert.

Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erhoben, das der Region um K20 des menschlichen Histons H4 entspricht und eine monomethyl-Modifikation trägt. Er ist so konzipiert, dass er nur die monomethylierte Form von H4K20 spezifisch erkennt, was ihn zu einem wertvollen Werkzeug für die Untersuchung der unterschiedlichen biologischen Effekte verschiedener H4K20-Methylierungsstatus macht.

Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Da Histon H4 über Eukaryoten hinweg hochkonserviert ist, wird für diesen Antikörper eine Reaktivität mit vielen Spezies vorausgesagt. Dennoch sollte die Kreuzreaktivität für Systeme außerhalb von Mensch/Maus/Ratte empirisch überprüft werden.
• Für das Western Blotting: Anreicherung von Histonproteinen oder Verwendung von Säureextraktionsmethoden verbessern die Detektion von H4K20me1, da Histone in Gesamtzelllysaten durch abundant vorkommende Nichthistonproteine maskiert werden können.
• Bei Dot-Blot (DB)-Anwendungen: Fügen Sie sowohl unmodifizierte als auch monomethylierte Peptidkontrollen hinzu, um die Modifikationsspezifität zu bestätigen.
• Für die Immunhistochemie (IHC): Antigen-Retrieval-Schritte können erforderlich sein, da Histone in formalinfixierten Geweben eng mit DNA assoziiert sind.
• Bei Verwendung der Immunfluoreszenz (IF/ICC): Führen Sie eine Co-Färbung mit einem Nuklearmarker durch, um die erwartete nukleare Lokalisation zu bestätigen.
• ELISA-Protokolle sollten immobilisierte Peptide oder Histonextrakte verwenden. Stellen Sie sicher, dass das beschichtete Antigen das monomethylierte K20-Epitop für eine optimale Detektion präsentiert.
• Dieser Antikörper ist spezifisch für Monomethyl-K20 und detektiert aufgrund des Immunogen-Designs kein di- oder trimethyliertes K20 oder unmodifiziertes H4. Validieren Sie die Spezifität trotzdem in Ihrem Proben system unter Verwendung geeigneter Negativkontrollen (z. B. Zelllinien mit verändertem H4K20-Methylierungsstatus).

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