MonoMethyl-Histon H4-K20 (P62805) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für Epigenetik-Forschung, WB/ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H4

Histon H4 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Dies begrenzt die Zugänglichkeit der DNA und spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen, kollektiv als „Histone-Code“ bezeichnet, und Nukleosom-Remodelling reguliert. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Histon H4 lokalisiert im Zellkern und ist eine strukturelle Komponente der Chromosomen. Acetyliertes H4 wird im Kern von Spermatiden im Stadium 11 nachgewiesen. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Lysin 20 von Histon H4 (entspricht Position 21 im全长-Protein) unterliegt Mono-, Di- und Trimethylierung. Monomethylierung bei H4K20 wurde mit Chromatinverdichtung, Heterochromatinbildung und der Reaktion auf DNA-Schäden in Verbindung gebracht. Diese Modifikationen erweitern die funktionelle Vielfalt des Histone-Codes. Verwandte Referenzen: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

Histon H4 ist über Spezies hinweg hochkonserviert und weist eine Vielzahl weiterer posttranslationaler Modifikationen auf, darunter Acetylierung, Citrullinierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung an mehreren Resten. Diese Konservierung macht H4 zu einem wertvollen Ziel für die Untersuchung der epigenetischen Regulation in verschiedenen Modellorganismen. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches monomethyliertes Peptid rund um K20; erwägen Sie, die Antikörperspezifität durch einen Peptid-Wettbewerbs-ELISA unter Verwendung von unmodifizierten sowie mono-, di- und trimethylierten K20-Peptiden zu verifizieren.
• Für Western Blots wird eine saure Extraktion von Histonen oder eine Kernfraktionierung empfohlen, um Histon H4 anzureichern. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 11 kDa; verwenden Sie ein 15% SDS-PAGE-Gel oder ein Gradientengel für eine optimale Trennung niedermolekularer Histone.
• Angesichts der breit vorhergesagten Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte und andere) validieren Sie den Antikörper im entsprechenden ProbenSystem, da die Signalintensität je nach endogenem Methylierungsgrad variieren kann.
• Ein ELISA-Assay kann verwendet werden, um relative MonoMethyl-H4K20-Spiegel unter Verwendung standardisierter Histonpräparationen zu quantifizieren.

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