MonoMethyl-Histone H3-R8 (Q16695/P68431) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histone H3.1t/H3.1

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die DNA in Chromatin verpackt und die Zugänglichkeit für Transkription, Replikation und Reparatur einschränkt. Posttranslationale Modifikationen (PTMs) der Histon-Schwänze bilden einen „Histone-Code“, der diese Prozesse reguliert.
Verwandte Referenzen: UniProt: Q16695, P68431.

Das menschliche Genom kodiert mehrere H3-Varianten: H3.1 ist ubiquitär und wird durch mehrere Gene kodiert (H3C1–H3C12), während H3.1t (H3-4/HIST3H3) testisspezifisch ist.
Verwandte Referenzen: UniProt: Q16695.

Arginin 8 (R8) im N-terminalen Schwanz kann Monomethylierung (wie von diesem Antikörper gezielt), symmetrische Dimethylierung (durch PRMT5) oder Citrullinierung unterliegen. Diese Markierungen beeinflussen den Chromatinzustand und die Genexpression.
Verwandte Referenzen: PMID:15345777, PMID:16567635.

Histon H3 lokalisiert im Zellkern und auf den Chromosomen mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von ca. 15 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches monomethyliertes Peptid um Arginin 8; der Antikörper sollte vorwiegend monomethyliertes H3R8 nachweisen. Überprüfen Sie die Spezifität mit Kontrolllysat/Peptiden, um Kreuzreaktivitäten mit symmetrischer Dimethylierung oder Citrullinierung an derselben Stelle auszuschließen.
• Für Western Blots verbessert eine Histon-Anreicherung (Säureextraktion) oft das Signal; die erwartete Bande liegt bei ~15 kDa.
• Bei IHC-P werden eine hitzeinduzierte Antigen-Retrieval und Hodengewebe (reich an H3.1t) als positive Kontrollen empfohlen.
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung, da das Ziel im Zellkern liegt.
• ELISA-Assays können von der Verwendung eines Monomethyl-Peptidstandards zur Kalibrierung profitieren.
• Es wird vorhergesagt, dass der Antikörper mit Mensch, Maus, Ratte und anderen Spezies aufgrund der Sequenzkonservierung reagiert; jedoch wird eine Validierung im entsprechenden Probenystem empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; Titrieren und validieren Sie neue Chargen stets erneut.

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