MonoMethyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431) Kaninchen-pAk für WB, ChIP-seq, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3 Funktion und Lokalisierung

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Diese strukturelle Rolle ist grundlegend für die Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomale Stabilität. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Die H3.1- und H3.1t-Varianten (kodiert durch Gene wie H3C1, H3C2 usw. bzw. H3-4) weisen eine hohe Sequenzähnlichkeit auf und lokalisieren im Kern und in den Chromosomen. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431
• H3.1t (Q16695) wird spezifisch in testikulären Zellen exprimiert, was auf eine spezialisierte Rolle bei der Chromatinorganisation während der Spermatogenese hindeutet. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695
• Histone unterliegen einer Vielzahl von posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Methylierung, Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung. Lysin 9 von Histon H3 (H3K9) ist eine kritische Position für die Methylierung, wobei die Mono-, Di- und Trimethylierungszustände jeweils unterschiedliche biologische Ergebnisse haben. Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches monomethyliertes Peptid rund um K9 hergestellt, was die spezifische Detektion von H3K9me1 ermöglicht. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Die dynamische Regulation der H3K9-Methylierung ist an der Heterochromatinbildung, der transkriptionellen Repression und der epigenetischen Vererbung beteiligt. Monomethylierung (H3K9me1) ist oft mit euchromatischen Regionen und Genaktivierung assoziiert, obwohl ihre funktionelle Rolle je nach genomischem Kontext variieren kann. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting (WB) empfehlen wir die Verwendung von kernangereicherten Lysaten, um die Detektion von Histon H3 zu verbessern. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~15 kDa; passen Sie den Acrylamidanteil des Gels und die Transferbedingungen entsprechend an. Fügen Sie immer geeignete Molekulargewichtsmarker hinzu.
• Wenn Sie diesen Antikörper für Immunpräzipitations-basierte Anwendungen wie ChIP und ChIP-seq verwenden, überprüfen Sie die Spezifität durch Einbeziehung von Negativkontrollen (z. B. nicht methyliertes Peptid oder Zellen/Gewebe ohne die Modifikation) und Positivkontrollen (z. B. Zellen, von denen bekannt ist, dass sie H3K9me1 enthalten). Die Optimierung der Vernetzung und die Fragmentierungseffizienz sind entscheidend.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) oder Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie Methoden zur Antigen-Retrieval und Permeabilisierungsschritte in Betracht ziehen, um nukleäre Epitope freizulegen. Validieren Sie die Färbung in bekannten positiven und negativen Geweben.
• Angesichts der vorhergesagten breiten Kreuzreaktivität wird erwartet, dass der Antikörper H3K9me1 bei Mensch, Maus, Ratte und anderen Spezies erkennt. Wir raten dennoch dazu, die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probenystem zu bestätigen.

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