MonoMethyl-Histone H3-K36 Rabbit mAb (Q16695/P68431) für WB, DB, IP, ELISA, ChIP

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von MonoMethyl-Histone H3-K36

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, welches die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Diese Struktur begrenzt die Zugänglichkeit der DNA und spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, der DNA-Reparatur, der DNA-Replikation und der chromosomalen Stabilität. Die dynamische Regulation des Chromatins wird teilweise durch ein komplexes Array posttranslationaler Modifikationen der Histone vermittelt, die gemeinsam als der „Histon-Code“ bezeichnet werden.

• Beim Menschen kodieren mehrere Gene für kanonische Histon-H3-Varianten. H3.1 (dargestellt durch SWISS P68431 und seine vielen Genprodukte wie H3C1–H3C12) ist die vorherrschende replikationsabhängige Form. Eine testisspezifische H3-Variante, H3.1t (SWISS Q16695; auch bekannt als H3/t oder H3.4), wird ausschließlich in Hodenzellen exprimiert und könnte zur Reorganisation des Chromatins während der Spermatogenese beitragen.

• Der N-terminale Schwanz von Histon H3 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich der Methylierung spezifischer Lysinreste. Die Monomethylierung von Lysin 36 (H3K36me1) ist eine solche kritische Modifikation, die der Methylierung von Lys-37 in der kanonischen UniProt-Sequenz entspricht. Diese Modifikation wurde in mehreren proteomischen Studien identifiziert. Verwandte Referenzen: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708

• H3K36me1 wurde mit der transkriptionellen Elongation, dem prä-mRNA-Spleißen und der DNA-Reparatur in Verbindung gebracht. Die Modifikation wird durch Methyltransferasen wie NSD1, NSD2 und SETD2 (die auch höhere Methylierungszustände katalysieren können) etabliert und durch Histon-Demethylasen entfernt. Ihre genomische Verteilung ist typischerweise mit aktiven Genkörpern assoziiert, was ihre Rolle bei der Genregulation unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein synthetisches monomethyliertes Peptid, das um K36 des menschlichen Histons H3 zentriert ist. Bei der Gestaltung und Validierung experimenteller Arbeitsabläufe sollte berücksichtigt werden, dass die Erkennung durch den Antikörper vom spezifischen Methylierungszustand (me1) abhängen kann und durch benachbarte posttranslationale Modifikationen beeinflusst werden kann. Für ChIP-Anwendungen stellen Sie sicher, dass der Zielchromatin-Kontext und die Antikörperspezifität mithilfe geeigneter positiver und negativer Kontrollen überprüft werden.

• Beim Western Blotting entspricht die erwartete Proteinbande ungefähr 15 kDa. Verwenden Sie Gele mit hohem Prozentsatz (z. B. 12–15 % SDS-PAGE) und optimierte Transferbedingungen (niedriges Molekulargewicht), um eine klare Auflösung zu erzielen. Die Verwendung eines Histon-Markers oder einer Gesamt-H3-Kontrolle wird für eine genaue Identifizierung empfohlen.

• Für ELISA und Dot Blot (DB) kann die Einbeziehung synthetischer Peptide, die unmethylierte, monomethylierte, dimethylierte und trimethylierte H3K36 darstellen, in das Assay-Design helfen, die modifikationsspezifische Erkennung zu bestätigen.

• Das Produkt listet eine breite vorhergesagte Kreuzreaktivität auf (Mensch, Maus, Ratte und andere). Obwohl dies auf eine breite Artenkompatibilität hindeutet, wird eine Validierung mit Ihrer spezifischen Art und Ihrem Gewebetyp dringend empfohlen, insbesondere für nicht-menschliche Anwendungen.

• Für alle Anwendungen sollten optimale Arbeitsverdünnungen und Bedingungen experimentell unter Verwendung des entsprechenden Probensystems ermittelt werden.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio ist Ihr One-Stop-Partner für die Beschaffung von IVD-Rohmaterialien und bietet validierte Antikörper-Paare, optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper, Hilfsreagenzien in Bulk und die Beschaffung seltener Ziele an Diagnostikhersteller und Forschungsinstitute weltweit. Unser Portfolio umfasst eine Reihe von histonmodifikationsspezifischen Antikörpern wie den MonoMethyl-Histone H3-K36 Rabbit mAb, der die Epigenetik-Forschung und die Entwicklung von IVD-Assays unterstützt. Kontaktieren Sie CamelBio, um maßgeschneiderte, End-to-End-Beschaffungslösungen zu erkunden, die Ihren Diagnostik-Workflow vom Konzept bis zur Klinik beschleunigen.