MonoMethyl-Histon H3-K36 (Q16695 / P68431) Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und kompaktiert. Histone spielen dadurch eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, der DNA-Reparatur, der DNA-Replikation und der chromosomalen Stabilität. Die Zugänglichkeit der DNA wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen von Histonen – auch als Histon-Code bezeichnet – und die Nukleosomenumformung reguliert.

Histon H3 lokalisiert im Zellkern und auf Chromosomen, was mit seiner grundlegenden Rolle für die Chromatinstruktur übereinstimmt.

Die UniProt-Accessionen Q16695 und P68431 entsprechen Histon H3.1t (hodenspezifisch) beziehungsweise H3.1 (kanonisch). H3.1t (Q16695) wird in Hodenzellen exprimiert, während H3.1 (P68431) als replikationsabhängiges Histon breit exprimiert wird.

Histon H3 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen an zahlreichen Resten, darunter Methylierung, Acetylierung, Phosphorylierung und weitere. Insbesondere die Monomethylierung an Lysin 36 (entspricht Rest 37 des Volllängenproteins) wurde in proteomischen Studien nachgewiesen. Diese Modifikation gehört zu den vielen Bestandteilen des Histon-Codes und reguliert die Chromatinfunktion.

Verwandte Referenzen: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blot (WB) ist eine Bande um 15 kDa zu erwarten. Es wird empfohlen, Kernextrakte zu verwenden und die Spezifität mit einem monomethylierten Peptid-Konkurrenzassay zu validieren.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte eine Kernfärbung beobachtet werden. Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen können Optimierung erfordern; testen Sie gegebenenfalls Paraformaldehyd- versus Methanolfixierung.
• Für ChIP-seq kann dieser Antikörper verwendet werden, um die Verteilung von H3K36me1 im gesamten Genom zu kartieren. Fügen Sie geeignete Kontrollen wie Input-DNA und nicht-immunes IgG hinzu. H3K36me1 ist typischerweise in Genkörpern aktiv transkribierter Gene angereichert.
• Basierend auf Sequenzkonservierung wird eine breite Kreuzreaktivität über Arten hinweg vorausgesagt. Eine Validierung in Proben von Nicht-Menschen, Nicht-Mäusen oder Nicht-Ratten wird vor der Verwendung empfohlen.
• Kombinieren Sie den Antikörper mit anderen Antikörpern gegen Histonmodifikationen, um epigenetische Wechselwirkungen zu untersuchen. Validieren Sie immer im relevanten Probenystem und berücksichtigen Sie bei quantitativen Anwendungen die Charge-Konsistenz.

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