MonoMethyl-Histon H3-K27 Kaninchen mAb (Q16695/P68431) – Methyliertes Histon H3 Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin einwickelt und kompaktiert. Diese Struktur schränkt die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinerien ein und spielt dadurch eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird über einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen von Histonen, auch als Histon-Code bezeichnet, und Nukleosomen-Remodellierung reguliert. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

• Histon H3 lokalisiert zum Zellkern und assoziiert mit Chromosomen. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

• Die kanonischen Histon H3.1-Isoformen (kodiert von mehreren Genen) werden im Allgemeinen in sich teilenden Zellen exprimiert, während die H3.1t-Variante (Q16695) spezifisch in Hodenzellen exprimiert wird. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695

• Histon H3 unterzieht sich umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Methylierung, Acetylierung, Phosphorylierung und Citrullinierung an spezifischen Resten. Lysin 27 (K27) ist eine bekannte Modifikationsstelle; sein monomethylierter Zustand (H3K27me1) ist mit Genregulation assoziiert. Verwandte Referenzen: PMID:16567635

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches monomethyliertes Peptid um K27, was eine hohe Spezifität für die H3K27me1-Markierung bedeutet. Bei der Verwendung des Antikörpers sollten Sie methylierte und unmodifizierte Peptidkontrollen in Dot-Blot- oder ELISA-Assays einschließen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für Western Blotting (WB) werden histonangereicherte Säureextrakte oder gesamte Kernlysate empfohlen. Eine typische Beladungsmenge von 10–20 µg Kernxtrakt kann verwendet werden, aber eine Optimierung im jeweiligen Probensystem wird empfohlen.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung mit Triton X-100 oder einem ähnlichen Detergenz notwendig, um eine Kernfärbung zu ermöglichen. Eine Co-Färbung mit einem totalen H3-Antikörper kann helfen, Methylierungssignale zu normalisieren.
• aufgrund der Sequenzkonservierung wird eine Kreuzreaktivität über einen breiten Artenbereich vorausgesagt; validieren Sie den Antikörper aber immer in der Zielspezies oder dem Zielgewebe, falls er dort noch nicht getestet wurde.
• Dieser Antikörper ist geeignet für epigenetische Forschung mit Fokus auf Histonmodifikationen und Chromatindynamik; erwägen Sie seine Verwendung in ChIP-ähnlichen Anwendungen nach sorgfältiger Validierung.

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