MonoMethyl-Histone H3-K27 (H3K27me1) Kaninchen polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, IHC, ChIP & ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, dient als Gerüst für die DNA-Verpackung und spielt eine zentrale Rolle bei der Regulierung der Transkription, der DNA-Replikation und -reparatur. Posttranslationale Modifikationen (PTMs) von Histon H3, einschließlich der Methylierung an spezifischen Lysinresten, bilden einen dynamischen „Histon-Code“, der die Chromatinstruktur und die Genexpression steuert. Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:17194708
• Subzellulär ist Histon H3 im Zellkern lokalisiert und in Interphase- und Mitosezellen mit Chromosomen assoziiert.
• Gewebeexpression: Das kanonische Histon H3.1 (kodiert durch mehrere Gene einschließlich H3C1, H3C2, usw.) ist weitgehend in somatischen Geweben exprimiert, während die testisspezifische Variante H3.1t (Q16695) eine eingeschränkte Expression in Hodenzellen zeigt.
• Lysin 27 (K27) von Histon H3 ist ein kritischer Rest für posttranslationale Modifikationen, einschließlich Citrullinierung PMID:16567635. Die Monomethylierung von H3K27 (H3K27me1) ist einer der Methylierungszustände, die die Chromatinarchitektur und die Transkription beeinflussen. Dieser Antikörper erkennt spezifisch H3K27me1.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches monomethyliertes Peptid rund um K27 von menschlichem Histon H3. Bei Verwendung dieses Antikörpers sollten Sie in Erwägung ziehen, Peptid-Wettbewerbsassays durchzuführen, um die modifikationsspezifische Bindung zu bestätigen.
• Für die Western Blot (WB)-Analyse wird eine Bande bei ca. 15 kDa erwartet, die Histon H3 entspricht. Die Verwendung geeigneter Ladungskontrollen und Histon-Extraktionsprotokolle kann die Detektion verbessern.
• Bei auf Immunpräzipitation basierenden Anwendungen wie ChIP sollten Sie sicherstellen, dass das Chromatin ausreichend fragmentiert ist, und die Antikörperspezifität unter Verwendung positiver und negativer genomischer Loci (z. B. Regionen mit bekannter H3K27me1-Anreicherung) validieren.
• Die Kompatibilität mit mehreren Spezies (Mensch, Maus, Ratte und andere) wird basierend auf der Sequenzhomologie vorhergesagt; es wird jedoch empfohlen, die Kreuzreaktivität in der entsprechenden Spezies und im experimentellen System zu validieren.
• Optimale Arbeitsverdünnungen für ELISA, Dot Blot (DB) und Immunhistochemie sollten vom Endbenutzer empirisch bestimmt werden.

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