MonoMethyl-Histon H3 (K14) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, IF, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

• Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Dies begrenzt die Zugänglichkeit der DNA und spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, der DNA-Reparatur, der DNA-Replikation und der chromosomalen Stabilität.
• Es gibt mehrere H3-Varianten; dieser Antikörper erkennt sowohl die somatische H3.1 (SWISS: P68431) als auch die testisspezifische H3.1t (SWISS: Q16695). H3.1t wird vorwiegend in testikulären Zellen exprimiert.
• Histon H3 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, die gemeinsam als „Histon-Code“ bezeichnet werden und die Chromatindynamik regulieren. Dazu gehören Methylierung, Acetylierung, Phosphorylierung und andere an zahlreichen Resten. Verwandte Referenzen: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:10464286
• Monomethylierung an Lysin 14 (H3K14me1) ist mit der Transkriptionsregulation verbunden und ist ein Substrat für spezifische Lysin-Demethylasen. Der Antikörper wurde gegen ein monomethyliertes Peptid um K14 herum erzeugt und wird erwartet, diese Modifikation spezifisch zu erkennen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches monomethyliertes Peptid erzeugt, das den Resten um K14 von humanem Histon H3 entspricht; es wird erwartet, dass er die monomethylierte Form erkennt, aber eine Kreuzreaktivität mit unmodifiziertem H3 oder anderen Modifikationen sollte überprüft werden.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei ca. 15 kDa erwartet, die Histon H3 entspricht. Ziehen Sie in Erwägung, geeignete Kontrollen einzubeziehen (z. B. Lysate aus Zellen, die mit Histon-Deacetylase-/Methyltransferase-Inhibitoren behandelt wurden), um die Spezifität zu verifizieren.
• Für IF/ICC können Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen die Epitop-Zugänglichkeit beeinflussen; eine Optimierung wird empfohlen.
• ELISA kann zur Quantifizierung der relativen Spiegel der H3K14-Monomethylierung verwendet werden; die Verwendung von Peptid-Kompetitoren kann die Bindungsspezifität bestätigen.

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