MonoMethyl-Histon H2B-K5 Kaninchen Polyklonaler Antikörper (P62807/Q16778) für WB, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H2B-Funktion und Lokalisierung

Histon H2B ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und kompaktiert. Diese Kompaktierung begrenzt die DNA-Zugänglichkeit und spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. H2B existiert als mehrere Isoformen, die von verschiedenen Genen kodiert werden, wobei die UniProt-Accessionsnummern P62807 (Histon H2B Typ 1-C/E/F/G/I) und Q16778 (Histon H2B Typ 2-E) Hauptvarianten darstellen.

Über seine strukturelle Rolle hinaus besitzt H2B eine breite antibakterielle Aktivität und könnte zur antimikrobiellen Barriere des Kolonepithels und der bakteriziden Aktivität des Fruchtwassers beitragen.

H2B wird umfassend posttranslational modifiziert, was zum "Histon-Code" beiträgt, der die Chromatin-Dynamik reguliert. Modifikationen umfassen Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Krotonylierung und Ubiquitinierung an mehreren Lysin-, Serin- und Argininresten. Die spezifische Monomethylierung an Lysin 5 (K5me1) ist eine solche Markierung, die die Genexpression und den Chromatinzustand beeinflussen kann. Der hier beschriebene Antikörper wurde gegen ein synthetisches monomethyliertes Peptid hergestellt, das K5me1 von humanem H2B entspricht, und bietet ein Werkzeug für die epigenetische Forschung.

Histon H2B ist im Zellkern und auf Chromosomen lokalisiert, was mit seiner nukleosomalen Funktion übereinstimmt.

Verwandte Referenzen: Histonmodifikationen wie Acetylierung und Methylierung wurden umfassend charakterisiert PMID:16627869. Weitere Studien haben neue Acylierungen einschließlich Krotonylierung PMID:21925322 und Lactylierung PMID:31645732 an H2B-Lysinen identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting (WB) verwenden Sie Kernextrakte, um Histonproteine anzureichern. Das Signal für MonoMethyl-H2B-K5 kann schwach sein; ziehen Sie Peptid-Kompetitionsassays in Betracht, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) stellen Sie eine ordnungsgemäße Zellpermeabilisierung sicher und erwägen Sie eine Chromatin-Präextraktion, um die Antikörperzugänglichkeit zu Histonzielen zu verbessern.
• Für ELISA-basierte Assays beschichten Sie Platten mit dem monomethylierten Peptid oder Histonextrakten und validieren Sie mit dem Antikörper.
• Der Antikörper hat eine vorhergesagte breite Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte und andere); dennoch sollten Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem mit geeigneten Kontrollen überprüfen.
• Wie bei jedem posttranslationalen modifikationsspezifischen Antikörper kann es von Charge zu Charge zu Variabilität kommen; schließen Sie in jedes Experiment bekannte positive und negative Kontrollen ein.

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