Methyl-HP1 gamma/CBX3 (H175) Kaninchen-Polyclonale Antikörper Q13185 für Dot Blot & ELISA

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CBX3 (HP1 gamma)

CBX3, auch bekannt als HP1 gamma, ist ein Bestandteil des Heterochromatins, der Histon-H3-Schwänze erkennt und an Lys-9 methyliert bindet, was zu epigenetischer Repression führt. Es bindet auch an Histon H1.4, das an Lys-26 methyliert ist (H1.4K26me), und wird von Chromatin ausgeschlossen, wenn H1.4 gleichzeitig methyliert und phosphoryliert ist. Zugehörige Referenzen: [PMID:11242053] [PMID:16127177]

Durch die Interaktion mit Proteinen des MIS12-Komplexes ist CBX3 an der Bildung funktioneller Kinetochore beteiligt. Es trägt zur Umwandlung von lokalem Chromatin in einen heterochromatin-ähnlichen repressiven Zustand über H3 Lys-9 Trimethylierung bei und vermittelt die Rekrutierung der Methyltransferasen SUV39H1/2 durch den PER-Komplex an zirkadiane Zielgene wie PER2 und PER1. Zugehörige Referenzen: [PMID:15502821]

CBX3 vermittelt auch die Rekrutierung von NIPBL an Stellen von DNA-Schäden bei Doppelstrangbrüchen, was eine Rolle bei der DNA-Reparatur unterstreicht. Zugehörige Referenzen: [PMID:28167679]

Subzellulär ist CBX3 ein nukleäres Protein, das mit Euchromatin assoziiert ist und weitgehend von konstitutiv Heterochromatin ausgeschlossen wird. Es kann während der Mitose auch mit Mikrotubuli und den Mitosepolen assoziiert sein. Zugehörige Referenzen: [PMID:28977666]

Posttranslationale Modifikationen von CBX3 umfassen die N-terminale Acetylierung, mehrere Lysinacetylierungen und die Phosphorylierung an mehreren Serinresten (Ser93, Ser95, Ser97, Ser99, Ser176), die seine Funktion und Interaktionen regulieren. Zugehörige Referenzen: [PMID:19608861] [PMID:16964243] [PMID:20068231] [PMID:21406692] [PMID:18669648] [PMID:24275569] [PMID:23186163]

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die N-terminale Region (AA 1‑183) von humanem CBX3 ab; erwägen Sie die Überprüfung der Epitoperkennung bei der Verwendung von Trunkierungsmutanten oder isoformspezifischen Assays.
• Optimieren Sie für Dot Blot (DB) Blockierung und Antikörperverdünnung, um unspezifische Bindung an die Membran zu minimieren. Eine vorläufige Titration wird empfohlen.
• Stellen Sie bei ELISA sicher, dass die Antigenbeschichtung das interessierende methylierte Epitop entspricht. Validieren Sie den Assay im entsprechenden Probensystem (z. B. Kernextrakte aus humanen Zelllinien).
• Es sollten Protokolle zur Kernextraktion verwendet werden, um CBX3 anzureichern, da es überwiegend ein nukleäres Protein ist. Vermeiden Sie harte denaturierende Bedingungen, die die methylspezifische Epitoperkennung verändern könnten.
• Verwenden Sie passende Kontrollen (z. B. rekombinante methylierte vs. unmethylierte CBX3-Peptide), um die Spezifität für die methyl-H175-Modifikation zu bestätigen.
• Dieser Antikörper wurde nur an humanen Proben getestet; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht evaluiert. Validieren Sie vor der Verwendung in der Zielspezies.

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