Kaninchen-polykolonaler MDA5-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BYX4

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MDA5 (IFIH1)

• Kodiert das Interferon-induzierte Protein 1 mit C-Domäne der Helikase (IFIH1), auch bekannt als Melanom-Differenzierungs-assoziiertes Protein 5 (MDA5), RIG-I-ähnlicher Rezeptor 2 (RLR-2), Helicard und CADM-140-Autoantigen. Es gehört zur Familie der RIG-I-ähnlichen Rezeptoren zytoplasmatischer Mustererkennungsrezeptoren.
• Fungiert als wichtiger Sensor der angeborenen Immunität, der virale RNA im Zytoplasma erkennt und antivirale Reaktionen einschließlich der Produktion von Interferon Typ I und proinflammatorischen Zytokinen auslöst. Zugehörige Referenzen: PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• Erkennt spezifisch mRNA ohne 2'-O-Methylierung an der 5'-Cap-Struktur sowie lange doppelsträngige RNA (>1 kb) als Nicht-Selbst-Signaturen einer Virusinfektion. Zugehörige Referenzen: PMID:22160685
• Lokalisiert sich nach der Ligandenbindung in den Mitochondrien und assoziiert mit MAVS/IPS1, was zur Aktivierung der Kinasen TBK1 und IKBKE, zur Phosphorylierung von IRF3 und IRF7 sowie zur transkriptionellen Induktion von Interferonen (IFN-α und IFN-β) führt.
• Erkennt ein breites Spektrum von Viren, einschließlich Picornaviridae (z. B. Enzephalomyokarditisvirus, Rhinovirus), Coronaviren (einschließlich SARS-CoV-2), Flaviviren (Denguevirus, West-Nil-Virus), Reovirus und Vacciniavirus. Zugehörige Referenzen: PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• Verstärkt die Signalübertragung der angeborenen Immunität durch die Erkennung von RNA-Metaboliten, die durch die antivirale Endoribonuklease RNase L erzeugt werden, und verbessert dadurch die Wirtsabwehr.
• Wird weitverbreitet in niedrigen Mengen exprimiert, mit vergleichsweise höherer Expression in Plazenta, Pankreas und Milz sowie kaum nachweisbarer Expression in Gehirn, Hoden und Lunge.
• Kommt im Zytoplasma und im Zellkern vor und assoziiert sich bei Aktivierung mit den Mitochondrien. Strukturell enthält es zwei N-terminale CARD-Domänen und eine C-terminale Helikase-Domäne mit ATP-bindenden und RNA-bindenden Aktivitäten. Genetische Variationen in IFIH1 stehen mit Autoimmunerkrankungen wie dem Aicardi-Goutières-Syndrom und Typ-1-Diabetes in Verbindung.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen 205 Aminosäuren, die die beiden CARD-Domänen einschließen. Dieses Design kann sowohl vollständiges IFIH1 (vorhergesagt ca. 117 kDa) als auch potenzielle Spaltprodukte oder Isoformen (ca. 25 kDa) erkennen, die unter bestimmten Bedingungen beobachtet werden.
• Beim Western Blot wurden sowohl Banden bei 25 kDa als auch bei 117 kDa berichtet. Validieren Sie das Expressionsmuster in den für Sie relevanten Zell- oder Gewebelysaten und erwägen Sie die Verwendung von Positivkontrollen (z. B. virusinfizierte oder interferonstimulierte Proben) für einen zuverlässigen Nachweis.
• Für Immunhistochemie und Immunfluoreszenz können Bedingungen zur Antigen-Retrieval erforderlich sein. Pilotversuche mit bekannten positiven Geweben (z. B. Plazenta, Pankreas) werden empfohlen.
• Bei einem polyklonalen Antikörper kann es zu Chargen-zu-Chargen-Variabilität kommen. Titrie-ren Sie den Antikörper für jede neue Anwendung und verwenden Sie geeignete Kontrollen, um die Spezifität sicherzustellen.

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