MDA5 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q9BYX4

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MDA5-Funktion und Lokalisierung

• MDA5, kodiert durch das IFIH1-Gen, ist ein Receptor des angeborenen Immunsystems, der als zytoplasmischer Sensor für virale Nukleinsäuren wirkt und antivirale Antworten auslöst, einschließlich der Induktion von Typ-I-Interferon und proinflammatorischen Zytokinen. Verwandte Referenzen: PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• Seine Liganden umfassen lange doppelsträngige RNA (>1 kb) und mRNA ohne 2'-O-Methylierung am 5'-Cap, was die Unterscheidung zwischen körpereigener und nicht-körpereigener RNA ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:22160685
• Nach Bindung an virale RNA unterliegt MDA5 Konformationsänderungen und assoziiert mit MAVS/IPS1 auf den Mitochondrien, was zur Phosphorylierung von IRF3/IRF7 und der Transkription von Interferon-Genen führt.
• MDA5 ist maßgeblich an der Erkennung von Mitgliedern der Familie Picornaviridae (z. B. Enzephalomyokarditis-Virus) und Coronaviren einschließlich SARS-CoV-2 beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• Das Protein enthält zwei N-terminale CARD-Domänen, eine zentrale DExD/H-Box-Helikase-Domäne mit ATPase-Aktivität und eine C-terminale regulatorische Domäne; es lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, aber auch im Zellkern und in den Mitochondrien.
• Posttranslationale Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und ISGylierung regulieren die MDA5-Signalgebung, um aberrante Interferonantworten zu verhindern; Mutationen sind mit dem Aicardi-Goutières-Syndrom und Typ-1-Diabetes assoziiert.
• Weit verbreitet exprimiert auf niedrigem Niveau, mit relativ höherer Expression in Plazenta, Bauchspeicheldrüse und Milz.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting wird erwartet, dass der Antikörper das全长-IFIH1/MDA5-Protein bei ~117 kDa nachweist; eine Bande bei 25 kDa kann ebenfalls aufgrund von alternatives Spleißen oder Spaltung auftreten. Validieren Sie dies im entsprechenden Proben-System.
• Bei Immunpräzipitationsassays sollten Sie die zytoplasmische und mitochondriale Lokalisierung von MDA5 sowie die dynamische Natur seiner Aktivierungskomplexe berücksichtigen.
• Für ELISA kann dieser rekombinante monoklonale Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz dienen; Kombinieren Sie ihn mit einem sorgfältig ausgewählten Detektionsantikörper, um Empfindlichkeit und Spezifität zu gewährleisten.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–205), die die tandem CARD-Domänen enthält; diese Region ist hochkonserviert und für die antivirale Signalübertragung essentiell.

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