MCM5-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - P33992

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von MCM5

• Der Faktor MCM5 für die Lizenzierung der DNA-Replikation ist eine Kernkomponente des MCM2-7-Komplexes, der als replizierende Helikase für die Initiierung und Verlängerung der DNA-Replikation in eukaryotischen Zellen unerlässlich ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:40940420

• MCM5 ist eine integrale Untereinheit des CDC45-MCM-GINS-(CMG)-Helikasekomplexes, der molekularen Maschine, die während der S-Phase für die Entwindung der Matrizen-DNA an der Replikationsgabel verantwortlich ist.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:16899510
  PMID:32453425
  PMID:34694004

• Die ATPase-Aktivität des MCM2-7-Rings wird durch sechs aktive Zentren beigetragen, die an den Schnittstellen der Untereinheiten gebildet werden und ein konserviertes, in trans bereitgestelltes Arginin-Finger-Motiv enthalten, wobei diese Zentren unterschiedlich zur Helikasefunktion beitragen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:32453425

• MCM5 befindet sich im Zellkern und ist mit Chromosomen assoziiert. Es spielt eine entscheidende Rolle dabei, eine einmalige DNA-Replikation pro Zellzyklus zu gewährleisten, indem es am Aufbau des Prä-Replikationskomplexes beteiligt ist.

• Zu den posttranslationalen Modifikationen von MCM5 gehören Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Funktion und Proteininteraktionen innerhalb des Systems zur Lizenzierung der DNA-Replikation regulieren.

• MCM5 ist auch unter den Aliasnamen CDC46 und P1-CDC46 bekannt, was seine Homologie zu Proteinen des Zellteilungszyklus in Hefen widerspiegelt. Es gehört zur Familie der ATP-abhängigen MCM-Helikasen.

• Mutationen in MCM5 wurden mit dem Meier-Gorlin-Syndrom 8 (MGORS8) in Verbindung gebracht, einer Erkrankung, die durch primordialen Kleinwuchs und Mikrozephalie gekennzeichnet ist und seine essenzielle Rolle bei der Zellproliferation unterstreicht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 635-734 innerhalb der C-terminalen Region des humanen MCM5 (P33992); dieses Epitop kann sowohl unter denaturierenden als auch unter nativen Bedingungen zugänglich sein.
• Beim Western Blot sollte in Ganzzelllysaten aus menschlichen, Maus- oder Rattenzelllinien eine erwartete Bande bei etwa 82 kDa beobachtet werden. Geeignete Molekulargewichtsmarker und Ladekontrollen sollten einbezogen werden.
• Bei der Immunhistochemie wird empfohlen, die Methoden zur Antigenfreilegung und die Verdünnung des Primärantikörpers für formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Gewebe zu optimieren, um eine spezifische nukleäre Färbung zu erzielen.
• Der Antikörper kann für die Immunpräzipitation von MCM5 und die Co-Immunpräzipitation interagierender Mitglieder des MCM-Komplexes geeignet sein; eine Validierung mit bekannten Interaktionspartnern wird empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz gegen rekombinantes MCM5 oder Zelllysate eingesetzt werden. Die Kombination mit einem nicht überlappenden Klon kann die Leistung eines Sandwich-Assays verbessern.

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