MADCAM1 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA - Q13477

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MADCAM1-Funktion und -Lokalisation

• MADCAM1 (mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ist ein Zelladhäsionsrezeptor, der auf mukosalen Venolen exprimiert wird und den Lymphozyten-Transport in mukosale Gewebe wie Peyersche Plaques und die intestinale Lamina propria lenkt.
• Es bindet sowohl Integrin α4β7 als auch L-Selektin und reguliert so die Leukozytenpassage und -retention. Isoform 2, der die Mucin-ähnliche Domäne fehlt, könnte sich auf die Integrin α4β7‑abhängige Adhäsionsverstärkung unabhängig von L-Selektin spezialisieren.
• Das Protein ist ein Typ-I-Transmembranglykoprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie, das Immunglobulin-ähnliche Domänen und eine mucinreiche Region (in der kanonischen Isoform) enthält.
• Die subzelluläre Lokalisation liegt überwiegend an der Plasmamembran, was mit seiner Rolle bei Zell-Zell-Interaktionen übereinstimmt.
• Gewebespezifität: Hoch exprimiert auf hoch endothelialen Venolen (HEV) und Venolen der Lamina propria im Dünndarm; geringere Expression im Kolon und in der Milz. Sehr gering in Bauchspeicheldrüse und Gehirn; fehlend in Thymus, Prostata, Ovarien, Hoden, Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und peripheren Blutleukozyten.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N‑verknüpfte Glykosylierung und Disulfidbrücken, die für die strukturelle Integrität und Ligandenbindung essentiell sind. Schlüsselwörter heben auch alternatives Spleißen und die Verfügbarkeit einer 3D‑Struktur hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 100‑200, eine extrazelluläre Region; bedenken Sie, dass der Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes MADCAM1 erkennen kann, aber die Epitopzugänglichkeit in fixierten Geweben sollte validiert werden.
• Für Western Blot ist unter reduzierenden Bedingungen ein Band um 40 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und verifizieren Sie mit einer positiven Kontrolle (z.B. humanem Darmgewebelysat).
• Bei IHC‑P kann eine Antigen-Demaskierung (hitze- oder enzymbasiert) notwendig sein, um das Epitop freizulegen; testen Sie mehrere Demaskierungsmethoden und Antikörperverdünnungen an bekannten positiven und negativen Geweben.
• ELISA-Bedingungen wie Beschichtungspuffer und Nachweissystem sollten individuell optimiert werden; ein Peptid-Konkurrenzassay kann helfen, die Spezifität zu bestätigen.
• Kreuzreaktivität wird für Human, Maus und Ratte angegeben; für andere Spezies führen Sie vor der Anwendung eine Sequenzalignment-Analyse und Vorversuche durch.

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