MAD1/MAD1L1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6D9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MAD1-Funktion und Lokalisierung

• MAD1L1 kodiert für das mitotische Spindel-Assemblierungs-Kontrollpunktprotein MAD1, auch bekannt als mitotisches Arrest-defizientes 1-ähnliches Protein 1, HsMAD1, hMAD1 und Tax-bindendes Protein 181.
• MAD1 ist eine Kernkomponente des Spindel-Assemblierungs-Kontrollpunkts (SAC), der den Beginn der Anaphase verhindert, bis alle Chromosomen korrekt an die Spindelmikrotubuli an der Metaphasenplatte gebunden sind. Verwandte Referenzen: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• An ungebundenen Kinetochoren bildet MAD1 einen heterotetrameren Komplex mit MAD2L1 in geschlossener Konformation (C-MAD2) und katalysiert die Konformationsumwandlung von offenem MAD2L1 (O-MAD2) zu C-MAD2, ein entscheidender Schritt bei der Erzeugung des diffusiblen "Warte-Anaphase"-Signals. Verwandte Referenzen: PMID:10049595, PMID:20133940, PMID:29162720
• Im Zytoplasma kann MAD1 MAD2L1 sequestrieren, was die SAC-Funktion beeinträchtigt und zur chromosomalen Instabilität in hepatozellulären Karzinomen beiträgt.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, Kinetochoren, Zentrosomen, Spindelpole und Zytoplasma, was seine dynamische Rolle während der Mitose widerspiegelt.
• Gewebespezifität: MAD1 wird auf Proteinebene in hepatozellulären Karzinomen und Hepatom-Zelllinien exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen: MAD1 unterliegt Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation, was seine Stabilität und Aktivität regulieren kann.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der zentralen Region (aa 360–700) von humanem MAD1L1, was die Erkennung sowohl der Vollversion als auch möglicher Spaltprodukte ermöglichen kann; dies sollte bei der Analyse von Bandenmustern in WB berücksichtigt werden.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~83 kDa; verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie HeLa-Zelllysate oder andere sich aktiv teilende Zelllinien, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IF/ICC ist eine Permeabilisierung erforderlich, um Zugang zu nukleärem und kinetochor-lokalisiertem MAD1 zu erhalten; validieren Sie die Färbung im relevanten Proben-System unter Bedingungen des mitotischen Arrests (z.B. Nocodazol-Behandlung).
• Die ELISA-Leistung kann vom Beschichtungspuffer und der Antigenpräsentation abhängen; erwägen Sie Standard-Protokolle für indirekten ELISA mit rekombinantem MAD1-Protein als Referenz.

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