LIMK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P53667

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: LIMK1-Funktion und -Lokalisierung

• LIMK1 (LIM-Domain-Kinase 1) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die N-terminale LIM- und PDZ-Domänen enthält und ein Schlüsselregulator der Dynamik der Aktinfilamente ist.
• Sie phosphoryliert und inaktiviert Cofilin (CFL1/CFL2) und Destrin (DSTN), wodurch die Depolymerisation von F-Aktin verhindert und das Aktin-Zytoskelett stabilisiert wird; dieser Prozess steuert die Zellmotilität, den Zellzyklusfortschritt und die Differenzierung (PubMed:10436159, PubMed:11832213, PubMed:12807904, PubMed:15660133, PubMed:16230460). Verwandte Referenzen: PMID:10436159 PMID:11832213 PMID:12807904 PMID:15660133 PMID:16230460
• Wird stromabwärts der Rho-GTPase-Signalwege durch die upstream-Kinasen ROCK1, PAK1 und PAK4 aktiviert, welche die Threoninrest in ihrer Aktivierungsschleife phosphorylieren (PubMed:10436159). Verwandte Referenzen: PMID:10436159
• Lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern, Zytoskelett und in Zellfortsätzen wie Lamellipodien.
• Die höchste Expression findet sich im Nervensystem (Erwachsene und Föten), insbesondere im Großhirnrinde, mit niedrigeren Spiegeln im Herzen und in der Skelettmuskulatur.
• Zusätzlich phosphoryliert LIMK1 TPPP, um die Dissoziation von Mikrotubuli zu fördern und stimuliert das axonale Auswachsen, was auf eine Rolle bei der Gehirnentwicklung hindeutet (PubMed:18028908). Verwandte Referenzen: PMID:18028908
• Assoziiert mit dem Williams-Beuren-Syndrom; verfügt über zinkbindende LIM-Domänen, eine ATP-bindende Kinasedomäne und unterliegt alternatives Spleißen und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen ein rekombinantes Fragment entworfen, das die Aminosäuren 510–647 des menschlichen LIMK1 überspannt und einen Teil der Kinasedomäne sowie C-terminale regulatorische Sequenzen abdeckt; dieses Design sollte die Erkennung des gesamten LIMK1-Proteins und potenziell mehrerer Isoformen ermöglichen.
• Für den Western Blot verwenden Sie Standard-denaturierende/reduzierende SDS-PAGE-Bedingungen; erwarten Sie ein Band bei ca. 73 kDa. Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen (z. B. Lysat aus Gehirn oder Skelettmuskel) und bestätigen Sie die Spezifität mittels siRNA-Knockdown oder Überexpression, falls erforderlich.
• Im ELISA kann dieser Antikörper für die indirekte Detektion von LIMK1 verwendet werden; optimieren Sie die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnungen entsprechend Ihrem Plattenformat und Ihrem Detektionssystem.
• Eine Kreuzreaktivität wird basierend auf der Sequenzhomologie mit Mensch, Maus und Ratte erwartet; überprüfen Sie die Leistung im entsprechenden Probensystem vor Hochdurchsatzassays.

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