LC3B-Kaninchen-polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q9GZQ8

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von LC3B

• LC3B (Mikrotubuli-assoziiertes Protein 1, leichte Kette 3 beta), auch bekannt als ATG8F oder MAP1LC3B, ist eine Kernkomponente des Autophagie-Signalwegs und gehört zur ATG8-Familie ubiquitinähnlicher Proteine.
• Es fungiert als ubiquitinähnlicher Modifikator, der für die Verlängerung der Phagophormembranen während der Autophagosomenbildung entscheidend ist. Zugehörige Referenzen: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B spielt eine zentrale Rolle bei selektiven Autophagie-Subtypen wie der Mitophagie, bei der es nach der mitochondrialen Fission durch Bindung an C-18-Ceramid Autophagolysosomen an der äußeren Mitochondrienmembran verankert. Zugehörige Referenzen: PMID:22922758
• Es fördert die primäre Ziliogenese, indem es die autophagische Entfernung von OFD1 aus zentriolären Satelliten vermittelt. Zugehörige Referenzen: PMID:24089205
• Unter Nährstoffstress interagiert LC3B mit dem Retikulophagie-Rezeptor TEX264, um ER-Subdomänen in Autophagosomen umzustrukturieren und dadurch den ER-Abbau zu erleichtern. Zugehörige Referenzen: PMID:31006537, PMID:31006538
• LC3B rekrutiert den Aktin-Nukleationsfaktor JMY direkt an die Phagophormembranen, wodurch die Aktinpolymerisation und die Autophagosomenbiogenese stimuliert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:30420355
• Auf subzellulärer Ebene findet sich LC3B auf Autophagosomenmembranen, zytoplasmatischen Vesikeln, Mitochondrienmembranen und im Zytoskelett; es durchläuft eine charakteristische Lipidierungsverschiebung vom zytosolischen LC3B-I zum membrangebundenen LC3B-II.
• Die Gewebeexpression ist im Herzen, Gehirn, Skelettmuskel und Hoden am höchsten und in der Leber niedriger.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 1–100 des humanen LC3B) liegt in der N-terminalen Region; ziehen Sie in Betracht, die Antikörperspezifität mithilfe von LC3B-Knockout- oder Knockdown-Modellen zu bestätigen.
• Im Western Blot erscheint LC3B typischerweise als zwei Banden: ein zytosolisches LC3B-I mit etwa 15 kDa und ein schneller migrierendes LC3B-II mit etwa 14 kDa (lipidierte Form) unter reduzierenden Bedingungen; bei der Analyse des Autophagieflusses sollten beide Formen berücksichtigt werden.
• Bei Immunfluoreszenzanwendungen müssen Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle möglicherweise optimiert werden, um unter Autophagie-induzierenden Bedingungen (z. B. durch Nährstoffentzug oder pharmakologische Behandlung) eine punktförmige Färbung der Autophagosomen sichtbar zu machen.
• Für ELISA ist auf einen geeigneten Beschichtungspuffer und die richtige Antikörperverdünnung zu achten; validieren Sie das System anhand bekannter Autophagiemarker in der jeweiligen Probenmatrix.

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