Lactylisiertes Histon H3 (K14) Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB/ELISA (Q16695/P68431)

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, essenziell für die Verpackung von DNA in Chromatin und für die Regulation der DNA-Zugänglichkeit während der Transkription, Reparatur, Replikation und der chromosomalen Stabilität. Es bildet zusammen mit H2A, H2B und H4 das Histonoctamer. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695 | UniProt P68431

Zwei wichtige Isoformen, die durch die SWISS-Zugangsnummern repräsentiert werden, sind Histon H3.1t (Q16695), das spezifisch in Hodenzellen exprimiert wird, und das kanonische Histon H3.1 (P68431), das von mehreren Genen kodiert und weit verbreitet exprimiert wird. Beide teilen eine hohe Sequenzhomologie, einschließlich des Lysin 14-Rests, der das Ziel dieses Antikörpers ist.

Histon H3 durchläuft eine umfangreiche Reihe posttranslationaler Modifikationen (PTMs), die den Histon-Code bilden und die Genexpression und Chromatindynamik beeinflussen. Diese PTMs umfassen Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und Lactylierung. Lactylierung an Lysinresten wurde an mehreren Positionen in Histon H3 identifiziert (z. B. K10, K19, K24, K28, K57, K80), wie in aktuellen Studien berichtet wurde. Verwandte Referenzen: PMID:31645732

Die subzelluläre Lokalisierung von Histon H3 ist überwiegend nuklear, wo es während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen assoziiert ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches lactyliertes Peptid um K14 des menschlichen Histon H3. Um die Antikörperspezifität zu bestätigen, erwägen Sie die Verwendung eines nicht-lactylierten (Kontroll-)Peptids oder führen Sie Peptid-Konkurrenzassays durch.
• Für Western Blot (WB) hat Histon H3 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 15 kDa, aber Probenvorbereitung und Trennbedingungen (z. B. Säureextraktion oder hochsalzige Kernextrakte) können die Detektion beeinträchtigen. Validieren Sie den Assay im relevanten Zell- oder Gewebesystem.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das lactylierte Antigen korrekt präsentiert wird. Direkte oder Sandwich-ELISA-Formate können mit Peptid oder rekombinantem Protein optimiert werden.
• Obwohl aufgrund der Sequenzkonservierung um die Modifikationsstelle herum eine Reaktion des Antikörpers mit einem breiten Spektrum von Spezies (Mensch, Maus, Ratte und andere) vorhergesagt wird, sollte die Kreuzreaktivität für jede neue Spezies oder jeden neuen Probentyp experimentell bestätigt werden.
• Da Histonlactylierung eine dynamische PTM ist, erwägen Sie die Einbeziehung geeigneter metabolischer Stimuli oder Umgebungsbedingungen, um die Modifikation vor der Analyse anzureichern.

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