KRAS+HRAS+NRAS Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01111 / P01112 / P01116

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Pan-Ras (KRAS/HRAS/NRAS)

• Das NRas-Protein ist eine kleine GTPase, die als molekularer Schalter im Ras-MAPK-Signalweg fungiert. Es kontrolliert Zellproliferation und Zellüberleben durch GDP/GTP-Zyklus und intrinsische GTPase-Aktivität (PubMed:30712867). Zugehörige Referenzen: PMID:30712867

• KRAS, HRAS und NRAS sind Mitglieder der klassischen Ras-Familie und weisen eine hohe Sequenzhomologie auf; sie regulieren vielfältige zelluläre Prozesse downstream von Wachstumsfaktorrezeptoren, aber jede Isoform kann unterschiedliche Funktionen und gewebsspezifische Expression aufweisen.

• Subzellulär lokalisiert sich NRas an der Zellmembran und der Golgi-Apparat-Membran, wo es extrazelluläre Signale an intrazelluläre Effektoren weitergibt.

• Posttranslationelle Modifikationen, einschließlich Farnesylierung, Palmitoylierung und Ubiquitinierung, steuern dynamisch den Transport und die Stabilität von NRas; beispielsweise markiert die LZTR1-vermittelte Ubiquitinierung NRas für den proteasomalen Abbau (PubMed:40934300). Zugehörige Referenzen: PMID:40934300

• Mutationen in NRAS, KRAS und HRAS, die die Proteine im GTP-gebundenen Zustand fixieren, sind starke onkogene Ereignisse, was Pan-Ras-Antikörper zu wertvollen Werkzeugen für die Krebsforschung und die Entwicklung von Diagnostika macht.

• Der Antikörper wurde gegen eine konservierte N-terminale Region (Aminosäure 1-100) von menschlichem NRAS entwickelt, die zwischen den drei Isoformen hochidentisch ist und eine breitbandige Detektion ermöglicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Aufgrund des Immunogendesigns gegen den konservierten N-Terminus von NRAS (Aminosäure 1-100) wird erwartet, dass der Antikörper KRAS, HRAS und NRAS erkennt; dennoch sollte die isoformspezifische Reaktivität mit rekombinanten Proteinen oder Knockout-Zelllinien validiert werden.
• Bei der Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 18 kDa beobachtet; verwenden Sie geeignete Beladungskontrollen und bestätigen Sie die Spezifität durch siRNA-Knockdown oder Überexpression.
• Bei IF/ICC sollten Sie Zellen mit 4 % PFA fixieren und mit Triton X-100 permeabilisieren; optimieren Sie die Antikörperkonzentration, um Hintergrund zu minimieren, da membranlokalisierte Ziele eine sanfte Permeabilisierung erfordern können.
• Für ELISA kann der Antikörper mit geeigneten Detektionsreagenzien kombiniert werden; stellen Sie sicher, dass die Plattenbeschichtung das Antigen in seiner nativen Konformation einfängt, um eine genaue Quantifizierung zu gewährleisten.
• Da die Ras-Signalübertragung streng reguliert ist, sollten Sie Kontrollen für posttranslationelle Modifikationen (z. B. Farnesylierungsinhibitoren) einschließen, wenn Sie die Membrantranslokation untersuchen.

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