KPNB1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14974

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: KPNB1-Funktion und Lokalisierung

• Importin-Untereinheit Beta-1 (KPNB1), auch bekannt als Karyopherin Beta-1 oder Importin-90, fungiert als Kern-Transportrezeptor und vermittelt den Proteintransport entweder in Verbindung mit einem Importin-Alpha-Adapter oder autonom durch direkte Erkennung von Kernlokalisierungssignalen (NLS). Verwandte Referenzen: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Der Importin/Substrat-Komplex dockt über die Bindung von KPNB1 an Nucleoporin-FxFG-Wiederholungen an den Kernporenkomplex (NPC) an, gefolgt von einer energieabhängigen, Ran-getriebenen Translokation durch die Kernhülle. Verwandte Referenzen: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Auf der nukleoplasmatischen Seite führt die RanGTP-Bindung zur Dissoziation des Komplexes und setzt die Fracht frei; die Importin-Untereinheiten werden dann für nachfolgende Transportzyklen ins Zytoplasma recycelt. Verwandte Referenzen: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• KPNB1 importiert autonom die ribosomalen Proteine RPL23A, RPS7 und RPL5 und kooperiert mit IPO7, um Histon H1 zu importieren; es kann auch den Kerntransport von Kernhistonen H2A, H2B, H3 und H4 in vitro vermitteln. Verwandte Referenzen: PMID:11682607, PMID:9687515, PMID:10228156

• Zusätzliche Fracht umfasst Transkriptionsregulatoren wie MRTFA, SNAI1 und PRKCI, was seine breite Rolle im signalabhängigen Kerntransport unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:11891849, PMID:19386897, PMID:20818336

• Während der HIV-1-Infektion bindet KPNB1 das virale Rev-Protein und vermittelt dessen Kerntransport, was die virale Replikation erleichtert.

• Das Protein lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma und an der Kernhülle, was mit seiner Funktion an der Kern-Zytoplasma-Grenzfläche konsistent ist.

• KPNB1 unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und ADP-Ribosylierung, und alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) ist eine Bande nahe 97 kDa zu erwarten; schließen Sie geeignete positive Kontrollen ein (z.B. HeLa-, HEK293-Lysate) und ziehen Sie die Verwendung einer Ladekontrolle zur Normalisierung in Betracht.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) testen Sie Antigen-Retrieval-Methoden (z.B. Citratpuffer, Tris-EDTA) und titrieren Sie die Antikörperverdünnung, um den Hintergrund zu minimieren; ein nukleäres/zytoplasmatisches Färbemuster ist zu erwarten.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierungs- (z.B. 4% PFA) und Permeabilisierungsbedingungen (z.B. 0,1% Triton X-100) und verwenden Sie einen geeigneten Sekundärantikörper zum Nachweis des primären Kaninchenantikörpers.
• ELISA-Anwendungen können mit indirekter Beschichtung des Peptid-Immunogens oder rekombinanten KPNB1-Proteins durchgeführt werden; validieren Sie die Assay-Bedingungen mit bekannten positiven und negativen Proben.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargenkonstanz bei Wechsel der Chargen in Langzeitstudien bestätigt werden.

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