[KO validiert] YTHDF2 Kaninchen mAb - Q9Y5A9

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von YTHDF2

• YTHDF2 ist ein m6A-Reader-Protein, das spezifisch an N6-Methyladenosin (m6A)-modifizierte RNAs bindet, um deren Stabilität und Prozessierung zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Es fördert den Abbau von m6A-haltigen mRNAs, indem es den CCR4-NOT-Deadenylase-Komplex durch direkte Interaktion mit CNOT1 rekrutiert. Verwandte Referenzen: PMID:27558897
• In Zusammenarbeit mit RIDA/HRSP12 leitet es Transkripte mit einer spezifischen Bindungsstelle (5'-GGUUC-3') zur Endoribonukleotidspaltung durch den Ribonuklease P/MRP-Komplex. Verwandte Referenzen: PMID:30930054
• Nach der Bindung an polymethylierte mRNAs geht YTHDF2 eine flüssig-flüssige Phasentrennung ein, die die Bildung von membranlosen Kompartimenten wie P-Körpern und Stressgranula antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Lokalisiert hauptsächlich im Zytosol, in P-Körpern und Stressgranula; bei Hitzeschock relokalisiert es in den Zellkern, um m6A-Marken zu schützen und die kap-unabhängige Translation zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:26458103
• Essentiell für die Oozytenreifung und Spermatogenese durch Kontrolle des mütterlichen mRNA-Abbaus (Ähnlichkeit).
• Reguliert die Spezifizierung hämatopoetischer Stammzellen und hemmt die neurale Differenzierung von iPSCs durch Förderung des Abbaus von m6A-modifizierten Zieltranskripten. Verwandte Referenzen: PMID:30065315, PMID:32169943
• Hemmt die Typ-I-Interferon-Antwort durch Bindung und Abbau von m6A-haltigen IFNB-Transkripten. Verwandte Referenzen: PMID:30559377
• Reguliert den zirkadianen hepatischen Lipidstoffwechsel durch Förderung des m6A-abhängigen Abbaus von PPARA-Transkripten. Verwandte Referenzen: PMID:30428350
• Hohe Expression in induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs) und Herabregulation während der neuralen Differenzierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für WB ist eine Startverdünnung von 1:1000 oft wirksam; dennoch wird eine Optimierung empfohlen. Validieren Sie die Spezifität mit Knockout-Zelllinien oder siRNA-Silencing.
• Für IHC-P führen Sie eine hitzinduzierte Antigenretrieval durch und erwägen Sie einen Verdünnungsbereich von 1:50 bis 1:200.
• Für IP können typische Antikörpermengen von 1-2 µg pro 500 µg Gesamtprotein getestet werden.
• Für ELISA wird eine Beschichtung mit dem Immunogenpeptid oder rekombinantem YTHDF2 empfohlen.
• Aufgrund der m6A-Bindungsfunktion sollte eine potenzielle Konkurrenz mit endogener methylierter RNA in IP und anderen RNA-assoziierten Assays berücksichtigt werden.

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