[KO Validiert] RAG2 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P55895

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RAG2-Funktion und -Lokalisierung

• Kernkomponente des RAG-Komplexes, eines Multiproteinkomplexes, der die DNA-Spaltungsphase während der V(D)J-Rekombination vermittelt und ein diverses Repertoire an Immunglobulin- und T-Zell-Rezeptor-Genen in sich entwickelnden B- und T-Lymphozyten zusammensetzt.
• RAG2 ist für alle bekannten katalytischen Aktivitäten erforderlich, die von RAG1 innerhalb des RAG-Komplexes vermittelt werden, und fungiert wahrscheinlich als Sensor für den Chromatinzustand, der den Komplex an an Lysin-4 trimethyliertes Histon H3 (H3K4me3) rekrutiert.
• Die V(D)J-Rekombination beinhaltet einen zweistufigen DNA-Spaltungsmechanismus: anfängliches Nicken stromaufwärts des Heptamers, gefolgt von einer direkten Transesterifizierungsreaktion, die haarnadelförmige Coding-Enden und stumpfe 5'-phosphorylierte Signal-Enden erzeugt.
• Der RAG-Komplex spielt auch eine Rolle bei der allelischen Exklusion von Prä-B-Zellen, indem er die Klonalität und monospezifische Expression von B-Zell-Antigenrezeptoren durch die Verlagerung des zweiten Immunglobulin-Allels in perizentromeres Heterochromatin erzwingt.
• Lokalisiert ausschließlich im Zellkern, konsistent mit seiner Rolle bei der DNA-Rekombination und Chromatin-Interaktion.
• Exprimiert spezifisch in Zellen der B- und T-Lymphozyten-Linien.
• Enthält Zinkfingerdomänen und bindet Metallionen; klassifiziert als Chromatinregulator, der an der DNA-Rekombination beteiligt ist und mit schwerer kombinierter Immundefizienz (SCID) assoziiert ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 351-527 von humanem RAG2; diese Region kann eine Reaktivität über Spezies hinweg verleihen, sollte jedoch in Ihrer Zielprobe validiert werden, insbesondere wenn nicht-human/Maus-Systeme verwendet werden.
• Für Western Blotting sollten Sie in Erwägung ziehen, Kernextrakte aus B- oder T-Zelllinien (z. B. Jurkat, Raji) als positive Kontrollen zu verwenden, mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von ca. 59 kDa.
• ELISA-Anwendungen können eine Optimierung der Beschichtungsantigene und Detektionsbedingungen erfordern; die polyklonale Natur des Antikörpers kann ein robustes Signal liefern, kann aber auch einen Hintergrund in komplexen Proben zeigen.
• Da die RAG2-Expression auf sich entwickelnde Lymphozyten beschränkt ist, stellen Sie sicher, dass Ihr experimentelles System die entsprechenden Zellpopulationen enthält; induzierte oder primäre Zellen erfordern möglicherweise eine sorgfältige Handhabung.

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