[KO validiert] HK1 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19367

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Hexokinase-1 (HK1)

• HK1 (Hexokinase-1) ist ein ~102 kDa großes Enzym, das die Phosphorylierung von Hexosen katalysiert – hauptsächlich D-Glukose zu Glukose-6-Phosphat, dem ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Glykolyse (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Verwandte Referenzen: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• Das Enzym phosphoryliert auch andere Hexosen wie D-Glukosamin, D-Fruktose, D-Mannose und 2-Desoxy-D-Glukose, aber nicht N-Acetyl-D-Glukosamin (PubMed:27374331). Verwandte Referenzen: PMID:27374331
• Über die Glykolyse hinaus fungiert HK1 als Mustererkennungsrezeptor für bakterielles Peptidoglykan und verbindet den Glukosestoffwechsel mit der Aktivierung der angeborenen Immunität. Wenn bakterielles N-Acetyl-D-Glukosamin im Zytosol freigesetzt wird, hemmt es HK1 und fördert seine Dissoziation von der äußeren mitochondrialen Membran, was die Aktivierung des NLRP3-Inflammasoms auslöst (PubMed:27374331). Verwandte Referenzen: PMID:27374331
• HK1 lokalisiert sich überwiegend auf der äußeren mitochondrialen Membran, kommt aber auch im Zytosol vor, wo seine metabolischen und immunologischen Funktionen kompartimentiert sind.
• Es gibt mehrere gewebespezifische Isoformen: Isoform 2 ist erythrozytenspezifisch, während die Isoformen 3 und 4 hodenspezifisch sind (PubMed:10978502). Verwandte Referenzen: PMID:10978502
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die enzymatische Aktivität und subzelluläre Lokalisation regulieren können.
• Genetische Varianten in HK1 sind mit Krankheiten wie Charcot-Marie-Tooth-Krankheit, hereditärer hämolytischer Anämie, geistiger Behinderung, Neurodegeneration, Neuropathie und Retinitis pigmentosa assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot erwarten Sie eine Bande bei ~102 kDa. Aufgrund der großen Proteingröße sollten Sie reduzierende Bedingungen und ausreichende Transferzeit berücksichtigen.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aa 21–219), die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die breite Artenkreuzreaktivität unterstützt.
• Beachten Sie bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC), dass HK1 überwiegend mitochondrial lokalisiert ist; es sollte ein mitochondriales Färbemuster erwartet werden. Antigen-Retrieval und Permeabilisierung können erforderlich sein.
• Bei Immunpräzipitation (IP) validieren Sie die Antikörperbindung unter nativen Bedingungen und verwenden Sie passende Isotyp-Kontrollen.
• Der Antikörper ist Knockout-validiert; dennoch sollten Sie immer positive und negative Kontrollen in Ihrem experimentellen System einschließen, um die Spezifität zu bestätigen.

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