[KO Validiert] ERK2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P28482

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ERK2-Funktion und -Lokalisierung

• ERK2, codiert durch das MAPK1-Gen, ist auch bekannt als mitogen-aktivierte Proteinkinase 1, extrazellulär signalregulierte Kinase 2, MAP-Kinase-Isoform p42 und MAPK2. Es ist eine Serin/Threonin-Kinase, die für die MAPK/ERK-Signaltransduktionskaskade unerlässlich ist und zusammen mit ERK1 (MAPK3) als Reaktion auf diverse Reize fungiert.
• ERK2 vermittelt eine Vielzahl von zellulären Prozessen, einschließlich Zellwachstum, Adhäsion, Überleben, Differenzierung, Transkriptionsregulation, Translation, Zytoskelett-Umlagerungen und Apoptose durch Phosphorylierung von über 160 identifizierten Substraten. Zu diesen Substraten gehören Transkriptionsfaktoren (z. B. ATF2, ELK1, FOS), zytoskelettale Elemente, Apoptoseregulatoren und Translationsregulatoren. Verwandte Referenzen: PMID:35831023
• Neben seiner Kinaseaktivität wirkt ERK2 als transkriptioneller Repressor, der an eine [GC]AAA[GC]-Konsensus-DNA-Sequenz bindet und interferon-gamma-induzierte Gene wie CCL5, IRF7 und STAT1 unterdrückt. Diese repressive Funktion ist unabhängig von seiner Kinaseaktivität.
• Subzellulär lokalisiert sich ERK2 im Zytoplasma, Zytoskelett (einschließlich Spindel, mikrotubuläres Organisationszentrum und Zentrosom), Zellkern, Membranhöhlen (Caveolae) und fokalen Adhäsionen, was seine Beteiligung an dynamischen zellulären Prozessen widerspiegelt.
• ERK2 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung (kritisch für seine Aktivierung), Acetylierung und ubiquitinähnlicher Konjugation, die seine Aktivität, Stabilität und subzelluläre Lokalisierung regulieren.
• Die Kinase phosphoryliert spezifisch PGK1 unter hypoxischen Bedingungen, lenkt es zu den Mitochondrien und unterdrückt die Bildung von Acetyl-CoA aus Pyruvat. Verwandte Referenzen: PMID:26942675

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser kaninchenpolyklonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erhoben, das die Aminosäuren 200–300 von humanem ERK2 (NP_002736.3) abdeckt. Forscher sollten in Erwägung ziehen, die Reaktivität in ihrem spezifischen Probenystem zu überprüfen, insbesondere bei der Verwendung von nicht-menschlichen, nicht-murinen oder nicht-rattes Modellen.
• Für Western Blot (WB)-Anwendungen wird empfohlen, geeignete positive und negative Kontrollen, einschließlich KO-validierter Lysate, zu verwenden, um die Bandspezifität beim erwarteten Molekulargewicht (~41 kDa) zu bestätigen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC-Experimenten sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, da ERK2 je nach Stimulationsstatus zwischen Zytoplasma und Zellkern wandert; die Verwendung von Serumhungern und Wachstumsfaktorstimulation kann helfen, die aktivierungsabhängige Lokalisierung zu visualisieren.
• Für ELISA kann die Kombination mit einem geeigneten Capture/Detektions-Antikörper die Empfindlichkeit erhöhen; Benutzer werden aufgefordert, die Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen für ihr Zielanalyt zu optimieren.
• Da es sich um ein polyklonales Reagenz handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überwacht werden; für Langzeitstudien werden routinemäßige Qualitätskontrollmaßnahmen vorgeschlagen.

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