KO validierter CDK7 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P50613

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK7

• Cyclin-abhängige Kinase 7 (CDK7) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die als katalytische Untereinheit des CDK-aktivierenden Kinase (CAK)-Komplexes fungiert und eine zentrale Rolle sowohl bei der Zellzyklusregulation als auch der RNA-Polymerase-II-vermittelten Transkription spielt. Zugehörige Referenzen: PMID:9852112
• CDK7 phosphoryliert die C-terminale Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II (POLR2A) an Ser5 – ein kritischer Schritt für die Transkriptionsinitiierung und das Promotor-Escape. Zugehörige Referenzen: PMID:19136461, PMID:26257281, PMID:28768201
• Als Teil des CAK-Komplexes aktiviert CDK7 wichtige cyclin-abhängige Kinasen (CDK1, CDK2, CDK4, CDK6) durch Phosphorylierung ihrer T-Loop-Threonine und treibt so den Zellzyklusfortschritt an. Zugehörige Referenzen: PMID:41100585
• CDK7 ist sowohl im Kern als auch im Zytoplasma lokalisiert, mit einer Anreicherung in der perinukleären Region.
• Es wird ubiquitären Expression in allen Geweben beobachtet, was mit seinen grundlegenden Funktionen bei der Zellteilung und Genexpression übereinstimmt.
• Als Reaktion auf DNA-Schäden phosphoryliert und aktiviert CDK7 p53, das wiederum CDK7 hemmt – es bildet sich eine Rückkopplungsschleife, die zu einem Zellzyklusarrest oder Apoptose führen kann. Zugehörige Referenzen: PMID:9372954, PMID:9840937
• CDK7 phosphoryliert auch weitere Substrate einschließlich SPT5, SF1 und CDK11B, wodurch es mit zusätzlichen Regulationsnetzwerken verbunden ist. Zugehörige Referenzen: PMID:9372954
• Wichtige posttranslationale Modifikationen von CDK7 sind Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 211–346 innerhalb der Kinasedomäne, was die Detektion von vollem Länge CDK7 (~39 kDa) und potenziellen Isoformen unterstützt; das rekombinante Protein kann als Positivkontrolle verwendet werden.
• Für die Western Blotting validieren Sie den Antikörper in Zelllinien wie HeLa oder HEK293 und verwenden Sie geeignete Lysepuffer, um die Phosphorylierungszustände zu erhalten.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC erwarten Sie ein Kern- und perinukleäres Färbemuster; verwenden Sie Isotypkontrollen und bestätigen Sie die Spezifität nach Möglichkeit in CDK7-depletierten Zellen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-CDK7 ist nachgewiesen; validieren Sie den Antikörper in entsprechenden Gewebslysaten, wenn diese Arten Teil Ihres Experimentsystems sind.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und verwenden Sie nach Möglichkeit das Immunogen oder gereinigtes CDK7-Protein als Standard.

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