[KO-validiert] CDK5 Kaninchen monoklonaler Antikörper - Q00535

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDK5-Funktion und -Lokalisierung

• Cyclin-abhängige Kinase 5 (CDK5) ist eine prolin-gerichtete Serin/Threonin-Proteinkinase, auch bekannt als Zellteilung-Proteinkinase 5, Tau-Proteinkinase II katalytische Untereinheit oder PSSALRE.
• CDK5 ist essentiell für den neuronalen Zellzyklusarrest und die Differenzierung und spielt eine kritische Rolle beim neuronalen Überleben, der Migration, dem axonalen und neuritischen Wachstum, der Synaptogenese und der synaptischen Plastizität.
• Die Kinase wird durch Bindung an die regulatorischen Untereinheiten CDK5R1 (p35) und CDK5R2 (p39) aktiviert, hauptsächlich in postmitotischen Neuronen, und phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten, einschließlich MAPT/TAU, MAP2, p53, HDAC1 und kleinen GTPasen.
• Im Zellkern phosphoryliert CDK5 Transkriptionsfaktoren wie MEF2, p53 und CLOCK und reguliert so die Genexpression, Apoptose und zirkadiane Rhythmen.
• Die subzelluläre Lokalisierung von CDK5 umfasst das Zytoplasma, den Zellkern, die Zellmembran, das Perikaryon, Lamellipodien, Wachstumskegel, die postsynaptische Dichte und Synapsen.
• Eine abnorme CDK5-Aktivität, oft angetrieben durch das proteolytische Fragment p25, ist an Neurodegeneration und Lissenzephalie beteiligt, wie durch wichtige Krankheitsassoziationen widergespiegelt wird.
• Ubiquitär exprimiert, mit besonders hoher Akkumulation in kortikalen Neuronen; auch in Hoden, Skelettmuskel, Kolon, Knochenmark und Eierstock gefunden.
  Verwandte Referenzen: PMID:17009320, PMID:19693690

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper ist KO-validiert und eignet sich daher sehr gut zur Bestätigung des CDK5-Gen-Knockouts in Zelllinien oder Geweben; ziehen Sie die Verwendung von Lysaten aus Wildtyp- versus Knockout-Proben als positive/negative Kontrollen in Betracht.
• Für Western Blot wird unter reduzierenden Bedingungen ein einzelnes Band bei etwa 33 kDa erwartet; validieren Sie Molekulargewichtsmarker und laden Sie angemessene Proteinmengen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) kann CDK5 je nach Zelltyp und Bedingungen im Zytoplasma, Zellkern oder an der Membran lokalisiert sein; optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung für neuronale Kulturen.
• Für IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Methoden und Antikörperverdünnung empirisch bestimmt werden; testen Sie an positiven Kontrollgeweben wie Gehirn oder Skelettmuskel.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise optimierte Beschichtungspuffer und Nachweissysteme; führen Sie Titrationsexperimente durch, um Arbeitskonzentrationen festzulegen.

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