KO validierter polyklonaler Kaninchen-Anti-VRK1-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q99986

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von VRK1

• Proteidentität: VRK1 (Vaccinia-related kinase 1) ist eine weit verbreitete Serin/Threonin-Protein-Kinase, die beim Menschen durch das VRK1-Gen (Gen-ID: 7443) kodiert wird. Sie gehört zur Familie der VRK-Kinasen und enthält konservierte katalytische und regulatorische Domänen.
• Chromatinregulation: VRK1 steuert die Chromatinorganisation durch Phosphorylierung von Histon H3 an Thr-4 und Histon H2AX – ein Prozess, der entscheidend für die Kernkondensation, den Verlauf der Mitose und die Genexpression ist. Verwandte Referenzen: PMID:31527692 PMID:37179361
• DNA-Schadensantwort: Als Reaktion auf DNA-Läsionen phosphoryliert VRK1 KAT5, verstärkt dessen Histon-Acetyltransferase-Aktivität und Chromatinbindung und modifiziert außerdem TP53BP1, um das Reparatursignal zu orchestrieren. Verwandte Referenzen: PMID:33076429 PMID:31527692
• Substratphosphorylierung und Transkriptionskontrolle: VRK1 phosphoryliert p53 an Thr-18, stört dessen Wechselwirkung mit MDM2 und stabilisiert p53, während es gleichzeitig ATF2 und JUN aktiviert, um die Gentranskription zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:10951572 PMID:15105425 PMID:31527692
• Cajal-Körper-Assemblierung: VRK1 lokalisiert sich in Cajal-Körpern und phosphoryliert Coilin – ein Schritt, der für die Integrität und Funktion der Cajal-Körper bei der RNA-Verarbeitung essenziell ist. Verwandte Referenzen: PMID:21920476 PMID:31090908
• Golgi-Auflösung: Während der Mitose löst die PLK3-vermittelte Phosphorylierung von VRK1 die Fragmentierung des Golgi-Apparats aus und erleichtert die gleichmäßige Aufteilung der Organellen auf die Tochterzellen. Verwandte Referenzen: PMID:19103756
• Gewebeexpression und Krankheitszusammenhänge: VRK1 ist hoch exprimiert in fötaler Leber, Hoden und Thymus; Mutationen im VRK1-Gen sind mit neurodegenerativen Erkrankungen und peripheren Neuropathien verbunden, was seine Rolle bei der Erhaltung von Neuronen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Immunogen-Design: Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fragment (AS 257-396) im C-terminalen Bereich des menschlichen VRK1 hergestellt. Diese Region weist eine moderate Konservierung über Spezies hinweg auf; überprüfen Sie die Sequenzhomologie, wenn Sie den Antikörper mit Proben nichtmenschlicher Spezies verwenden.
• Western Blotting: Erwarten Sie eine spezifische Bande bei etwa 45 kDa. Für höhere Sicherheit schließen Sie einen Knockout-(KO)-Zelllysat als Negativkontrolle und eine Positivkontrolle mit VRK1-Expression ein.
• IHC-P-Überlegungen: Standardmethoden zur Antigenretrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) sind in der Regel geeignet. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und schließen Sie Gewebeschnitte mit bekannter VRK1-Expression (z. B. Hoden, Thymus) als Positivkontrollen ein.
• ELISA-Optimierung: Verwenden Sie rekombinantes VRK1-Protein oder Peptid als Beschichtungsantigen. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen, und validieren Sie mit geeigneten Blockierungs- und Nachweisreagenzien.

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