KO-validierter monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Von Hippel-Lindau/VHL für WB, ELISA – P40337

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Von Hippel-Lindau/VHL

• pVHL ist eine Komponente zur Substraterkennung des VCB-Cul2-E3-Ubiquitin-Ligasekomplexes und vermittelt die sauerstoffabhängige Ubiquitinierung von Zielproteinen zum anschließenden Abbau durch das Proteasom.
• Unter normoxischen Bedingungen ubiquitiniert es spezifisch die Alpha-Untereinheiten des hypoxieinduzierbaren Faktors (HIF1A, HIF2A), was zum Abbau von HIF und zur Unterdrückung hypoxieregulierter Gene führt. Zugehörige Referenzen: PMID:10944113, PMID:17981124
• VHL moduliert außerdem die mTORC1-Signalübertragung, indem es die Ubiquitinierung und den Abbau von RPTOR fördert, und reguliert den sauerstoffabhängigen Abbau des adrenergen Rezeptors ADRB2. Zugehörige Referenzen: PMID:19584355, PMID:34290272
• Auf subzellulärer Ebene ist VHL im Zytoplasma, an der Zellmembran, im endoplasmatischen Retikulum und im Zellkern lokalisiert, was mit seinen Funktionen beim Proteinabbau und bei der Transkriptionskontrolle übereinstimmt.
• Das Protein wird im Gehirn und in den Nieren von Erwachsenen und Föten exprimiert; krankheitsassoziierte Mutationen stehen mit dem von-Hippel-Lindau-Syndrom, kongenitaler Erythrozytose und Krebs in Verbindung.
• Schlüsselwörter: Tumorsuppressor, alternative Initiation, alternatives Spleißen, Krankheitsvariante.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot sollte eine reduzierende SDS-PAGE und der Transfer auf eine PVDF- oder Nitrocellulosemembran in Betracht gezogen werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 24 kDa; für eine optimale Auflösung sollte daher ein 10–12%iges Gel verwendet werden.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität mithilfe von VHL-Knockout-Zelllinien oder Proben aus einer siRNA-vermittelten Herunterregulierung in humanen, murinen oder Rattenzellen, da eine Kreuzreaktivität besteht.
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Kombination mit einem monoklonalen Antikörper anderer Klonalität kann die Sensitivität in Sandwich-ELISA-Formaten erhöhen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung im jeweiligen Assaysystem. Typische Ausgangsverdünnungen für WB liegen bei 1:500–1:2000; eine empirische Titration wird jedoch empfohlen.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

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