[KO validiert] Anti-TRIM25 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q14258

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TRIM25

• TRIM25, auch bekannt als EFP, RNF147 oder ZNF147, ist eine E3-Ubiquitin/ISG15-Ligase, die zur Familie der Tripartit-Motiv-(TRIM)-Proteine gehört. Verwandte Referenzen: PMID:16352599
• Es wirkt als entscheidender Vermittler der angeborenen antiviralen Immunität, indem es die Lys-63-verknüpfte Polyubiquitinierung der viralen RNA-Sensoren RIG-I und IFIH1 katalysiert, was zur Interferonproduktion führt. Verwandte Referenzen: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849, PMID:23950712
• TRIM25 reguliert zusätzlich unterschiedliche Substrate: darunter 14-3-3 sigma (SFN) via ISGylierung, ZFHX3 via proteasomaler Degradation und den antiviralen Faktor ZAP/ZC3HAV1 via Ubiquitinierung, um die mRNA-Bindung zu verstärken. Verwandte Referenzen: PMID:16352599, PMID:17069755, PMID:22452784, PMID:28060952, PMID:28202764
• Im Kern fördert TRIM25 die Wiederaufnahme gestoppter DNA-Replikationsgabeln durch Ubiquitinierung der BLM-Helikase, vermittelt durch das KHDC3L-OOEP-Gerüst.
• TRIM25 unterdrückt die Autophagie durch Ubiquitinierung und Degradation des Cargo-Rezeptors p62/SQSTM1. Verwandte Referenzen: PMID:40542578
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, reichert sich aber auch in Stressgranula und im Kern an.
• TRIM25 wird ubiquitär exprimiert, wobei erhöhte Proteinspiegel in Brusttumoren nachgewiesen werden.
• Es unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und enthält charakteristische RING-, B-Box- und Coiled-Coil-Domänen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid entsprechend den Aminosäuren 100–200 von menschlichem TRIM25. Diese Region ist voraussichtlich zugänglich und kann eine gute Epitoperkennung ermöglichen; validieren Sie den Antikörper jedoch in Ihrer spezifischen Probenart.
• Dieser Antikörper ist für Western Blot (WB) und ELISA-Anwendungen validiert. Für WB erwägen Sie die Verwendung von Positivkontroll-Lysaten aus menschlichen Zelllinien oder Geweben, die TRIM25 exprimieren. Aufgrund der KO-Validierung weist er wahrscheinlich eine hohe Spezifität auf; bestätigen Sie die Knockdown-Effizienz in Ihrem System.
• Angesichts der Beteiligung von TRIM25 an der angeborenen Immunität kann die Behandlung von Zellen mit viralen Nachahmern (z. B. poly(I:C)) oder Interferonen die Expressionslevel modifizieren, die mit diesem Antikörper nachgewiesen werden können.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem TRIM25-Protein oder Zelllysaten als Beschichtungsantigen. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung entsprechend Ihren spezifischen Versuchsbedingungen.

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