[KO-validiert] Anti-Smad3-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ChIP, ELISA - P84022

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Smad3-Funktion und -Lokalisierung

• SMAD-Familienmitglied 3 (SMAD3), auch bekannt als Mothers against decapentaplegic homolog 3 (MADH3) oder hMAD-3, wird durch das SMAD3-Gen kodiert und fungiert als rezeptorreguliertes SMAD (R-SMAD) im TGF-beta-Signalweg.
• Wirkt als intrazellulärer Signaltransduktor und Transkriptionsmodulator: Nach Aktivierung durch TGF-beta- oder Aktiv-Typ-1-Rezeptorkinasen bildet es einen Komplex mit SMAD4 und translokiert in den Zellkern, um die Transkription von Zielgenen zu regulieren.
• Bindet an das TRE-Element in Promotoren von TGF-beta-responsiven Genen und kann einen SMAD3/SMAD4/JUN/FOS-Komplex an AP-1/SMAD-Stellen bilden, um die Transkription fein abzustimmen.
• Pendelt zwischen Zytoplasma und Zellkern; überwiegend zytoplasmatisch in Abwesenheit von Ligand und reichert sich im Zellkern nach Signalwegaktivierung an (PMID: nicht verfügbar).
• Reguliert Chondrogenese und Osteogenese, hemmt die frühe Knochenbruchheilung und moduliert die Wundheilung durch Beeinflussung von Keratinozytenwachstum/-migration und Monozytenchemotaxis auf hormonsensitive Weise.
• Unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, ADP-Ribosylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität, Stabilität und Interaktionen kontrollieren; enthält auch Zink-bindende Domänen, die für die DNA-Bindung essentiell sind.
• Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen, was zur funktionellen Diversität beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 100-200 von humanem Smad3 (NP_005893.1) umfasst. Diese Region ist konserviert, was die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit murinem und ratten Smad3 erklärt.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei ca. 48 kDa erwartet. Führen Sie geeignete Ladekontrollen und Molekulargewichtsmarker ein, um die Bandengröße zu bestätigen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) können die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z.B. hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung) je nach Gewebetyp und Fixierungsmethode optimiert werden müssen.
• Der Antikörper wurde für die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) validiert; die Verwendung von positiven und negativen Kontroll-Loci für Smad3-Bindung wird zur Sicherstellung der Spezifität empfohlen.
• Ebenfalls geeignet für Immunpräzipitation (IP) und ELISA. Endanwender sollten den Antikörper titrieren, um die optimale Verdünnung für ihre spezifischen experimentellen Systeme zu bestimmen.

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