[KO Validiert] Anti-RhoGDI Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - P52565

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RhoGDI (Rho GDP-Dissoziationsinhibitor 1) Funktion und Lokalisierung

• RhoGDI (Rho GDP-Dissoziationsinhibitor 1, auch bekannt als Rho-GDI alpha, GDIA1, NPHS8, RHOGDI-1) wird durch das ARHGDIA-Gen (Gen-ID: 396) kodiert. Es fungiert als Schlüsselregulator der Homöostase von Rho-Proteinen durch Kontrolle der GDP/GTP-Austauschreaktion.
• Durch die Hemmung der Dissoziation von GDP von Rho-Proteinen verhindert RhoGDI die GTP-Bindung und hält dadurch kleine GTPasen wie CDC42, RAC1 und RHOA in einem inaktiven zytosolischen Pool und schützt sie vor Abbau.
• RhoGDI zeigt eine außergewöhnlich hohe Affinität zu prenylierten Rho-Proteinen, wodurch es sowohl inaktive als auch aktivierte Formen aus Zellmembranen extrahieren und ihr Recycling und ihre subzelluläre Verteilung regulieren kann.
• Durch seine Modulation der Rho-GTPase-Aktivität beeinflusst RhoGDI die Zellmotilität; in Gliomzellen hemmt es Migration und Invasion durch Vermittlung von SEMA5A- und PLXNB3-Signalen, die RAC1 inaktivieren.
• Das Protein ist vorwiegend im Zytoplasma lokalisiert, was seiner Rolle entspricht, Rho-GTPasen von membrangebundenen Aktivierungsstellen fernzuhalten.
• Posttranslationale Modifikationen, die RhoGDI beeinflussen, umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und es ist ein Ziel für Ubiquitin-ähnliche Konjugation, was potenziell seine Stabilität und Funktion moduliert.
• Die kanonische Isoform hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 23 kDa (berechnet aus der Sequenz: ~23,2 kDa). Alternatives Spleißen führt zu zusätzlichen Isoformen, und das Protein ist ein Mitglied des Referenzproteoms.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 70-150 von humanem RhoGDI entspricht, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei ca. 23 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigem Molekulargewichtsbereich (z. B. 12-15 % Acrylamid) für eine optimale Auflösung.
• Dieser Antikörper kann in ELISA verwendet werden; eine geeignete Probenvorbereitung und Optimierung (z. B. Antigenbeschichtungskonzentration, Blockierungsbedingungen) wird für zuverlässige Ergebnisse empfohlen.
• Da RhoGDI ein zytosolisches Protein ist, sollten Zelllysate mit geeigneten Lysepuffern hergestellt werden, um eine effiziente Extraktion sicherzustellen und den Abbau des Ziels zu vermeiden.

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