[KO-validiert] Anti-PSAP-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – P07602

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PSAP

• PSAP kodiert Prosaposin, ein Vorläuferprotein, das proteolytisch in vier Saposin-Peptide (Saposin A, B, C und D) gespalten wird, die als essenzielle Kofaktoren für den lysosomalen Abbau von Sphingolipiden fungieren.
• Saposine erleichtern die Hydrolyse von Sphingolipiden, indem sie Lipidsubstrate aus Membranen extrahieren und sie den jeweiligen lysosomalen Enzymen präsentieren.
• Prosaposin fungiert außerdem als myelinotropher und neurotropher Faktor, der über die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren GPR37 und GPR37L1 signalisiert und dadurch das Überleben von Neuronen fördert.
• Im Lysosom aktiviert Saposin C die Glukozerebrosidase (GBA), indem es die Eigenschaften der Lipiddoppelschicht verändert und das Enzym vor proteolytischem Abbau schützt; Saposin D aktiviert die saure Ceramidase; Saposin A aktiviert die Galaktocerebrosidase; und Saposin B erleichtert den Abbau von Sulfatiden durch Arylsulfatase A.
• Überwiegend im Lysosom lokalisiert und in den extrazellulären Raum sezerniert, was mit seinen dualen Funktionen im intrazellulären Lipidstoffwechsel und in der interzellulären Signalübertragung übereinstimmt.
• Mutationen in PSAP stehen mit lysosomalen Speicherkrankheiten wie der Gaucher-Krankheit, der metachromatischen Leukodystrophie und kombinierten Saposinmängeln sowie mit der Parkinson-Krankheit in Verbindung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Beim Western Blot erkennt der Antikörper endogenes Prosaposin bei ungefähr 58 kDa; validieren Sie das Ergebnis mit geeigneten Kontrollen, beispielsweise Lysaten aus PSAP-Knockout-Zellen.
• Stellen Sie bei der Immunhistochemie sicher, dass die Methoden zur Antigenfreilegung für den jeweiligen Gewebetyp optimiert sind, und berücksichtigen Sie das lysosomale bzw. perinukleäre Färbemuster.
• Fügen Sie bei der Immunfluoreszenz einen Permeabilisierungsschritt ein, um den Zugang zu intrazellulären lysosomalen Kompartimenten zu ermöglichen; führen Sie eine Doppel- oder Mehrfachfärbung mit lysosomalen Markern durch, um die Lokalisation zu bestätigen.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 275–524 und enthält mehrere Saposin-Domänen; aufgrund des polyklonalen Charakters können sowohl die Vorläufer- als auch die prozessierten Formen nachgewiesen werden – validieren Sie die Spezifität in Ihrem Modellsystem.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; überprüfen Sie die Leistung zwischen den Spezies anhand positiver und negativer Kontrollen.

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