[KO Validiert] Anti-PKA RIIα (PRKAR2A) polyklonaler Antikörper - P13861

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKA RIIα (PRKAR2A) Funktion und Lokalisierung

• PRKAR2A kodiert die regulatorische Untereinheit Typ II-Alpha der cAMP-abhängigen Proteinkinase (PKA), eine von vier regulatorischen Isoformen, die die PKA-Aktivität modulieren.
• Bei Bindung von cAMP dissoziiert die regulatorische Untereinheit von den katalytischen Untereinheiten und setzt sie frei, um Downstream-Ziele in der cAMP-Signaltransduktionskaskade zu phosphorylieren.
• Regulatorische Ketten vom Typ II verankern PKA durch Interaktion mit A-Kinase-Ankerproteinen (AKAPs), wie z. B. MAP2-Kinase, an spezifische subzelluläre Orte und erleichtern so eine lokalisierte Signalgebung.
• Die Expression von PRKAR2A variiert zwischen den Geweben; die vier Typen der regulatorischen Untereinheiten zeigen unterschiedliche Gewebeverteilungen und können konstitutiv oder induzierbar reguliert werden.
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma und an der Zellmembran, was seiner Funktion in der compartmentalisierten cAMP-Signalisierung entspricht.
• Das PRKAR2A-Gen unterliegt alternativem Spleißen, und das Protein ist Acetylierung und Phosphorylierung unterworfen, mit einem berechneten Molekulargewicht von ca. 45,5 kDa (UniProt).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 1-404 von menschlichem PRKAR2A umfasst und darauf ausgelegt ist, Antikörper gegen mehrere Epitope zu erzeugen; dies kann die Empfindlichkeit über verschiedene Anwendungen und Spezies hinweg verbessern.
• Für den Western Blot ist ein Startverdünnungsbereich von 1:500–1:2000 oft geeignet; bestätigen Sie die Spezifität mithilfe von Knockout (KO)-Lysaten, da dieser Antikörper KO-validiert wurde.
• Aufgrund der Reaktivität mit Maus und Ratte kann der Antikörper für kreuzspezifische Studien in Betracht gezogen werden; validieren Sie jedoch die Expressionsnivevels in Ihrem Modellsystem.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten die Protokolle zur Fixierung und Permeabilisierung optimiert werden, da sich das Protein sowohl im Zytoplasma als auch in der Membran befindet.
• Für ELISA kann der Antikörper als Nachweisreagenz verwendet werden; eine Kombination mit einem geeigneten Fangantikörper wird empfohlen, sowie eine Standardoptimierung des Assays.

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