KO validierter polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen PHD2/EGLN1 für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZT9

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PHD2/EGLN1

• Egl Nine Homolog 1 (EGLN1), allgemein bekannt als PHD2, ist eine Prolylhydroxylase des Hypoxie-induzierbaren Faktors (HIF) und der primäre Sauerstoffsensor unter normoxischen Bedingungen.
• PHD2 katalysiert die Hydroxylierung spezifischer Prolinreste innerhalb der sauerstoffabhängigen Abbaudomänen von HIF1A und HIF2A, was zu einer VHL-vermittelten Ubiquitinierung und proteasomalen Degradation führt.
• Unter Hypoxie ist die PHD2-Aktivität reduziert, was die Stabilisierung von HIFα, die nukleäre Translokation und die transkriptionelle Aktivierung von Genen ermöglicht, die an Angiogenese, Erythropoese und metabolische Anpassung beteiligt sind.
• Das Enzym gehört zur EGLN-Familie der Dioxygenasen und enthält ein Zinkfingermotiv; es benötigt Eisen, 2-Oxoglutarat und Ascorbat als Kofaktoren für seine katalytische Funktion.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, außerdem wurden posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und S-Nitrosylierung beschrieben.
• Subzellulär lokalisiert sich PHD2 überwiegend im Zytoplasma, kann aber auch im Kern nachgewiesen werden.
• PHD2 wird weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Skelettmuskel, Herz, Gehirn und Niere; es kommt auch in Kardiomyozyten, Aortenendothelzellen und glatten Muskelzellen der Koronararterien vor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das dem N-terminalen Bereich (Aa 1-100) von humanem PHD2 entspricht; erwägen Sie die Verwendung eines Blockierungspeptids für Spezifitätskontrollen.
• Für Western Blotting ist ein Anfangsverdünnungsbereich von 1:500–1:2000 typisch; validieren Sie die optimale Verdünnung in Ihrem Probensystem und beachten Sie eine erwartete Bande bei ~46 kDa.
• Für IHC-P kann eine Antigenretrieval erforderlich sein; testen Sie citrate- oder EDTA-basierte Protokolle und fügen Sie geeignete Positivkontrollen hinzu (z. B. Herz- oder Skelettmuskelgewebe).
• Für IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden; PHD2 wird im Zytoplasma und Kern nachgewiesen.
• Der Antikörper wurde in KO-Proben validiert; fügen Sie bei der Untersuchung der Zielspezifität immer Knockout- oder Knockdown-Kontrollen hinzu.

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