[KO-validiert] Anti-PAK2 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13177

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PAK2-Funktion und Lokalisation

• PAK2 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die an der Zytoskelett-Regulation, Zellmotilität, Zellzyklusprogression, Apoptose und Proliferation beteiligt ist. Zugehörige Referenzen: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:19273597
• Es fungiert als nachgeschalteter Effektor der kleinen GTPasen CDC42 und RAC1; die Bindung aktiver GTPasen löst eine Konformationsänderung und Autophosphorylierung aus. Zugehörige Referenzen: PMID:7744004
• Vollständiges PAK2 fördert das Überleben und Wachstum von Zellen, während die Caspase-vermittelte Spaltung das pro-apoptotische p34-Fragment freisetzt, das in den Zellkern transloziert und den JNK-Signalweg aktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:7744004, PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063
• PAK2 phosphoryliert verschiedene Substrate, darunter MAPK4/6, JUN, Histon H4 (erleichtert den Nukleosomenaufbau), BAD, ribosomales Protein S6 und CASP7. Zugehörige Referenzen: PMID:21317288, PMID:21177766, PMID:21724829, PMID:21555521, PMID:27889207
• Über seine katalytische Aktivität hinaus bindet PAK2 an ARHGEF7 und GIT1, um die Spindelorientierung während der Mitose zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:19273597, PMID:19923322
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, im Zellkern, in der perinukleären Region und an Membranen.
• Ubiquitär exprimiert, mit höheren Konzentrationen in Skelettmuskulatur, Ovar, Thymus und Milz.
• PAK2 unterliegt Acetylierung, Myristoylierung und Ubiquitinierung; es ist ein allosterisches Enzym mit ATP-Bindungsaktivität und ist auch als p58, PAK65, gamma-PAK und PAK-2 bekannt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von vollständigem PAK2 ca. 58 kDa; unter apoptotischen Bedingungen kann das gespaltene ~34 kDa-Fragment beobachtet werden. Stellen Sie sicher, dass geeignete Kontrollen enthalten sind.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immuncytochemie (IF/ICC) zeigt PAK2 eine zytoplasmatische und nukleäre Färbung, mit möglicher Anreicherung in perinukleären Regionen und an Membranen.
• Für ELISA entspricht das Immunogen der N-terminalen Region (AS 1–212); die Kombination mit Antikörpern gegen andere Epitope kann die Entwicklung eines Sandwich-ELISA ermöglichen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargenkonsistenz überprüft werden; ziehen Sie die Verwendung von PAK2-Knockout-Zelllinien als Negativkontrollen in Betracht, um die Spezifität in Ihren Assays zu bestätigen.
• Standard-Blockierung und Verdünnungsoptimierung (z. B. beginnend bei 1:500 für WB) werden empfohlen; empirische Tests im relevanten Probensystem sind unerlässlich.

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