[KO validiert] Anti-NSDHL Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15738

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NSDHL-Funktion und -Lokalisierung

• NSDHL (Sterol-4-alpha-carboxylat 3-Dehydrogenase, decarboxylierend), auch als H105E3, XAP104, SDR31E1 oder HL bezeichnet, ist ein Enzym, das beim Menschen durch das NSDHL-Gen kodiert wird.
• Es katalysiert die NAD(P)(+)-abhängige oxidative Decarboxylierung der C4-Methylgruppen von 4-alpha-Carboxysterolen, einen kritischen Schritt in der Cholesterinbiosynthese nach Squalen (By similarity).
• NSDHL trägt zusätzlich zur Regulation des endozytischen Trafficking des epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptors (EGFR) bei (By similarity).
• Das Protein gehört zur Familie der 3-Beta-Hydroxysteroid-Dehydrogenasen/Isomerasen und besitzt Domänen der kurzkettigen Dehydrogenasen/Reduktasen (SDR); es wird als Oxidoreduktase klassifiziert, die NAD als Kofaktor nutzt.
• Subzellulär lokalisiert sich NSDHL an das Membran des endoplasmatischen Retikulums und an Lipidtropfen, was seiner zentralen Rolle im Sterolstoffwechsel entspricht.
• Es zeigt eine breite Gewebeexpression mit Nachweisen in Gehirn, Herz, Leber, Lunge, Niere, Haut und Plazenta.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, welche die Enzymaktivität oder Interaktionen modulieren können.
• Mutationen im NSDHL-Gen sind mit dem CHILD-Syndrom (kongenitaler Hemidysplasie mit ichthyosiformer Erythrodermie und Gliedmaßendefekten) und einer X-chromosomalen intellektuellen Beeinträchtigung verbunden, was seine Bedeutung bei lipidbedingten Entwicklungsstörungen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–240 von menschlichem NSDHL, einen Bereich, der konservierte katalytische Domänen enthält; dieses Design kann eine breite Erkennung über Arten hinweg gewährleisten, aber bestätigen Sie bei der Arbeit mit nicht gelisteten Organismen immer die Sequenzhomologie.
• Für Western Blots sollten Sie eine Positivkontrolle wie Lysat aus HeLa, HepG2 oder Mäuselebergewebe in Betracht ziehen; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ca. 42 kDa, obwohl posttranslationale Modifikationen zu leichten Verschiebungen führen können.
• Validieren Sie den Antikörper bei der Immunhistochemie (Paraffinschnitte) und Immunfluoreszenz in Geweben, von denen bekannt ist, dass sie NSDHL exprimieren (z. B. Haut, Plazenta), und optimieren Sie die Bedingungen der Antigen-Retrieval.
• Aufgrund der polyklonalen Natur kann der Hintergrund zwischen Chargen variieren; die Einbindung geeigneter Negativkontrollen (KO-Lysate oder blockierende Peptide) wird empfohlen, um die Spezifität zu bewerten.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Kombination dieses Antikörpers mit einem Fangantikörper, der ein anderes NSDHL-Epitop anzielt, die Assayempfindlichkeit erhöhen; eine vorläufige Titerung wird empfohlen.

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